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wlwabcd

铜虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】请教聚丙烯酰胺凝胶问题

请问各位高手配制聚丙烯酰胺凝胶时TEMED和AP的作用都是什么啊?我记得一个是交联剂一个是促凝的,记不清楚了。还有就是各位在显色时是怎么操作的?谢谢各位了!
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zhengfan1109

银虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5): good 2011-02-20 10:23:53
wlwabcd(金币+3): 2011-02-21 13:48:12
引用回帖:
Originally posted by wlwabcd at 2011-02-19 15:00:35:
请问各位高手配制聚丙烯酰胺凝胶时TEMED和AP的作用都是什么啊?我记得一个是交联剂一个是促凝的,记不清楚了。还有就是各位在显色时是怎么操作的?谢谢各位了!

APS为催化剂,temed为促凝剂。
聚合过程中,temed催化ap产生自由基,后者引发丙烯酰胺单体聚合,同时甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺间产生交联,从而形成三维网状结构。

显色有考染和银染,一般实验室时考染,配制染色液和脱色液,我们实验室的操作方式是,取胶,放入容器,微波炉加热30s,放置2min,倒染色液,加脱色液,震荡5min,倒脱色液,再加染色液重复之前步骤,然后就是加脱色液一直振荡至条带清晰了。
2楼2011-02-20 01:44:06
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dhd997(金币+1): good 2011-02-21 15:11:26

楼上正解,TEMED也称加速剂。你说的交联剂是甲叉双丙烯酰胺。
3楼2011-02-20 10:32:09
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Jack_Y

金虫 (小有名气)


★ ★
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dhd997(金币+1): 欢迎交流 2011-02-21 15:11:44
引用回帖:
Originally posted by zhengfan1109 at 2011-02-19 17:44:06:
APS为催化剂,temed为促凝剂。
聚合过程中,temed催化ap产生自由基,后者引发丙烯酰胺单体聚合,同时甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺间产生交联,从而形成三维网状结构。

显色有考染和银染,一般实验室时考染,配 ...

对“聚合过程中,temed催化ap产生自由基,后者引发丙烯酰胺单体聚合”这句话有疑问?既然APS为催化剂,temed为促凝剂,怎么还说"temed催化ap产生自由基"呢?
4楼2011-02-21 14:52:21
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jialili2009

金虫 (初入文坛)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wlwabcd at 2011-02-19 23:00:35:
请问各位高手配制聚丙烯酰胺凝胶时TEMED和AP的作用都是什么啊?我记得一个是交联剂一个是促凝的,记不清楚了。还有就是各位在显色时是怎么操作的?谢谢各位了!

我不是做有机的,只是最近需要所以接触较多,但是疑问更多,想问一下,你在这里做显色是想干什么的?
5楼2011-04-01 18:19:32
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wlwabcd

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by jialili2009 at 2011-04-01 18:19:32:
我不是做有机的,只是最近需要所以接触较多,但是疑问更多,想问一下,你在这里做显色是想干什么的?

不显色没办法看条带啊!而且我也不是做邮寄的,我是做生物的
6楼2011-04-07 17:08:21
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萧柏

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
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西瓜(金币+2): 鼓励 2011-04-11 16:09:20
取出胶用考马斯亮蓝染色20min,用重蒸水洗2次(1min),加脱色液在脱色摇床上脱色1-2小时,如果底色还很重可以多脱几次,我一般脱3次就可以很清楚了,染色液可以回收利用
7楼2011-04-11 15:03:06
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
染色用考马斯亮蓝,脱色的话,我是先用清水漂洗一次,然后直接加一勺氯化钠,脱色过夜。
8楼2011-04-11 16:10:27
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boqikang

新虫 (初入文坛)



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谢各位大侠了   长见识了
9楼2012-03-10 16:37:53
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a731705125

银虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhengfan1109 at 2011-02-20 01:44:06:
APS为催化剂,temed为促凝剂。
聚合过程中,temed催化ap产生自由基,后者引发丙烯酰胺单体聚合,同时甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺间产生交联,从而形成三维网状结构。

显色有考染和银染,一般实验室时考染,配制 ...

问一下,带跑出来后进行考染,你那步取胶,放入容器,微波炉加热30s,在加染色液前放微波炉是什么意思呢?
我们实验室好像是先加考马斯亮蓝再放微波炉吧,应该是方便考马斯亮蓝融进去。
10楼2012-03-10 21:18:45
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