应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » GUS染色染不上的原因
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
111/2返回列表12下一页
查看: 7954  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liyeer

铜虫 (小有名气)

[交流] GUS染色染不上的原因 已有2人参与

我用基因枪做瞬时表达分析，一共构建了14个表达载体，报告基因是GUS，转化农杆菌之后，用质粒打基因枪，材料是温室玉米的约2.5mm的胚。第一次打枪后用GUS染液染色，都有蓝色，而且很明显。隔了三个月之后，又做一次平行（一切实验条件和用具都一样），材料还是温室玉米的约2.5mm的胚。结果染色特别浅，而且有的没染上色。请高手解答一下，这是什么原因造成的？GUS染液应该没问题的
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-13 11:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cjzyfx

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by liyeer at 2013-05-13 17:21:50
打枪的DNA是包含构建好的载体质粒的农杆菌质粒
胚还是2.5mm的胚，第一次也是这样的胚...

首先，质粒就是质粒，没有什么农杆菌，大肠杆菌质粒的
一开始我以为你是用农杆菌侵染的，所以农杆菌状态可排除，每一批胚尽管都是2.5mm的，但是可能它的状态会差别很大，还有染色液，同样的染色液，染不同批次的东西结果也会有差别，跟材料的状态，环境的变化都有关系，再者，你这属于瞬时表达，结果重复性很差，也正常
赞一下(1人) 回复此楼
迷茫的蚊子
4楼2013-05-13 17:36:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjzyfx

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by liyeer at 2013-05-14 08:39:35
稳定转化同时也在做。稳定表达周期太长，我们实验室是做玉米的。玉米的转化率太低，构建的载体有14个，只有一两个构建能得到转化苗（按经验），而且转化事件不足10个。这样的结果完全不够啊。
我是硕士，就想着如 ...

瞬时表达是比较快，但是也有它的弊端，要想实验结果准确，最好是做的重复数多些，以降低误差
赞一下(1人) 回复此楼
迷茫的蚊子
8楼2013-05-14 09:04:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haiyanciniao

金虫 (著名写手)

自立自强自爱自律
多做几次吧，总结失败原因
赞一下(1人) 回复此楼
自立自强自爱自律，我就是我自己的神，在我活的地方！相信自己，相信未来。加油
9楼2013-05-14 11:32:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cjzyfx

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果是这样的话估计跟胚的状态，农杆菌的状态有关系
赞一下 回复此楼
迷茫的蚊子
2楼2013-05-13 14:49:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyeer

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cjzyfx at 2013-05-13 14:49:39
如果是这样的话估计跟胚的状态，农杆菌的状态有关系

打枪的DNA是包含构建好的载体质粒的农杆菌质粒
胚还是2.5mm的胚，第一次也是这样的胚
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-13 17:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyeer

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cjzyfx at 2013-05-13 17:36:07
首先，质粒就是质粒，没有什么农杆菌，大肠杆菌质粒的
一开始我以为你是用农杆菌侵染的，所以农杆菌状态可排除，每一批胚尽管都是2.5mm的，但是可能它的状态会差别很大，还有染色液，同样的染色液，染不同批次的东 ...

很精辟的回答！！！！！！！！受益匪浅
不好意思，再请教一下：瞬时表达应该做几个平行呢？如果平行之间差异很大，该怎么处理呢？
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-13 17:57:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjzyfx

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by liyeer at 2013-05-13 17:57:51
很精辟的回答！！！！！！！！受益匪浅
不好意思，再请教一下：瞬时表达应该做几个平行呢？如果平行之间差异很大，该怎么处理呢？...

瞬时表达本身就不靠谱，何不做稳定表达
赞一下 回复此楼
迷茫的蚊子
6楼2013-05-13 20:20:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyeer

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cjzyfx at 2013-05-13 20:20:15
瞬时表达本身就不靠谱，何不做稳定表达...

稳定转化同时也在做。稳定表达周期太长，我们实验室是做玉米的。玉米的转化率太低，构建的载体有14个，只有一两个构建能得到转化苗（按经验），而且转化事件不足10个。这样的结果完全不够啊。
我是硕士，就想着如果瞬时表达结果完整的话，就用瞬时的结果毕业
可是瞬时的实验也不顺利……
赞一下 回复此楼
7楼2013-05-14 08:39:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyeer

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by cjzyfx at 2013-05-14 09:04:00
瞬时表达是比较快，但是也有它的弊端，要想实验结果准确，最好是做的重复数多些，以降低误差...

恩，非常感谢！！！！！
回复此楼
10楼2013-05-15 16:56:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liyeer 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 338求调剂 +3 我想上岸ii 2026-04-05 3/150 2026-04-05 19:59 by nepu_uu
[考研] 315求调剂 +5 ＆123456789 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:55 by nepu_uu
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +10 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 18:51 by 蓝云思雨
[考研] 328分调剂 +6 门men 2026-04-04 6/300 2026-04-05 13:40 by imissbao
[考研] 工科08专硕机械275求调剂 +3 AaAa7420 2026-04-02 3/150 2026-04-05 13:26 by jp9609
[考研] 070300化学求调剂 +17 小黄鸭宝 2026-03-30 17/850 2026-04-05 12:03 by 宁馨哈哈
[考研] 270求调剂 +9 小杰pp 2026-03-31 11/550 2026-04-05 11:02 by 风雨无晴
[考研] 341求调剂 +3 学无止境，冲 2026-04-05 3/150 2026-04-05 09:40 by lbsjt
[考研] 一志愿郑大0705求调剂 +3 橘十一 2026-04-02 4/200 2026-04-05 00:05 by chongya
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
[考研] 调剂 +9 19945159693 2026-04-03 10/500 2026-04-04 20:16 by dongzh2009
[考研] 求调剂 +6 朔朔话 2026-04-02 7/350 2026-04-04 19:16 by 蓝云思雨
[考研] 322求调剂 +4 FZAC123 2026-04-03 4/200 2026-04-03 20:55 by zhq0425
[考研] 五邑大学土木工程招调剂生2026 +3 wyutj 2026-03-31 4/200 2026-04-03 18:21 by zengxj_7201
[考研] 260求调剂 +6 朱芷琳 2026-04-02 6/300 2026-04-02 20:27 by 6781022
[考研] 考研调剂 +12 Amber00 2026-03-31 12/600 2026-04-02 09:04 by sanrepian
[考研] 302求调剂一志愿北航070300，本科郑大化学 +8 圣日耳曼条 2026-04-01 11/550 2026-04-02 07:40 by chemdavid
[考研] 085602化学工程268分蹲调剂 +8 月照花林。 2026-04-01 8/400 2026-04-01 22:08 by 无际的草原
[考研] 求调剂，一志愿北林食品与营养095500，301分，已过六级，有科研经历 +4 快乐储蓄罐 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:26 by JourneyLucky
[考研] 085601 329分调剂 +6 yzsa12 2026-03-31 6/300 2026-03-31 15:23 by yanflower7133
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭