[交流] 【讨论】F-actin 染色中为什么染不出纤维状图片已有4人参与

Originally posted by dj04164 at 2010-10-26 11:02:54:
triton 时间短了 延长到20-30min室温或者4度过夜。
穿膜后不要用pbs洗了，全部改用0.1%triton+ 1%FBS洗，可以免掉封闭的步骤。鬼笔环肽也是拿这个液体稀释。
染色和观察过程需要避光。
注意激发光波长选择。
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Originally posted by fyw921 at 2010-10-26 16:53:04:

我是种在细胞爬片上用共聚焦观察的，爬片应该没问题，会不会是我的封闭步骤没完全封闭掉啊

Originally posted by dj04164 at 2010-10-26 23:40:26:

封闭的意思阻止非特异性结合。封闭不完全不会看不到细胞，可能会造成本底比较高。你可以使用我上面说了的缓冲液，那个可以边封闭边穿膜。

Originally posted by dj04164 at 2010-10-26 11:02:54:
triton 时间短了 延长到20-30min室温或者4度过夜。
穿膜后不要用pbs洗了，全部改用0.1%triton+ 1%FBS洗，可以免掉封闭的步骤。鬼笔环肽也是拿这个液体稀释。
染色和观察过程需要避光。
注意激发光波长选择。
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Originally posted by 凉亭 at 2011-05-15 22:03:48:
请问激发光波长 选择多大的 多谢 急