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小墨825

新虫 (小有名气)

[求助] 【急】!考马斯亮蓝的染色问题 已有5人参与

我昨天下午跑的电泳,室温(大约10℃)染了4h,然后脱色一夜,今天一看条带很淡,maker也很淡(这次上样10微升比前天上样5微升还淡i),背景色还是有蓝色的,应该不是脱色过长的问题吧,会不会染色时间太短了(前天染了一夜),我现在可以再复染再脱色吗???(染色液从去年用到现在都没换过)请大家给我分析原因。急着要啊,谢谢!!!
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lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-17 12:35:15
小墨825: 金币+3, 有帮助 2013-12-18 08:29:27
染色液也该换换了吧?放了这么久的,那就多染会,可以过夜染色
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2013-12-17 09:33:07
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zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-17 12:35:22
小墨825: 金币+10, 有帮助, 谢谢啊,已经送样做质谱了,不知道会不会有影响 2013-12-18 08:30:35
你染色液用太久了,一般R250染个几次就不行了,一般我们还是俭省的也只是用个7-8次,你都用一年,太佩服了,还有就是染色前将胶用清水洗一下,去除表面SDS可以降低背景
3楼2013-12-17 09:34:17
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小墨825

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-17 09:34:17
你染色液用太久了,一般R250染个几次就不行了,一般我们还是俭省的也只是用个7-8次,你都用一年,太佩服了,还有就是染色前将胶用清水洗一下,去除表面SDS可以降低背景

亲,我现在主要的问题是这块胶可不可以再复染再脱色,明天要寄样品去质谱,前天那块就是染了一夜效果还不错
4楼2013-12-17 09:37:16
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小墨825

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2013-12-17 09:33:07
染色液也该换换了吧?放了这么久的,那就多染会,可以过夜染色

我有意识到这个问题,错误犯大了,那我现在已经脱色了还能再染么
5楼2013-12-17 09:38:54
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zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-17 12:35:36
可以染色,这个没有关系,简易把背景先脱的淡一些再染,这样不会过多加深背景
6楼2013-12-17 09:39:56
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晨萍之水

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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小墨825: 金币+4, 有帮助 2013-12-18 08:31:02
可能温度太低了,我一般都是放在80℃的烘箱里30min 。
不过染色液的确改换了!!!!
~勇敢和执着也是一种霸气~
7楼2013-12-17 10:50:40
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晨萍之水

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小墨825 at 2013-12-17 09:37:16
亲,我现在主要的问题是这块胶可不可以再复染再脱色,明天要寄样品去质谱,前天那块就是染了一夜效果还不错...

完全可以再染   我有一次胶染了3次
~勇敢和执着也是一种霸气~
8楼2013-12-17 10:51:37
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Mornchen

银虫 (小有名气)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-17 12:35:53
小墨825: 金币+2 2013-12-18 08:31:13
胶可以再用来染色,但是染色液最好换了,一年也太久啦。。。
9楼2013-12-17 11:04:04
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zhuzhicheng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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小墨825: 金币+1, 有帮助 2013-12-18 08:31:18
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-01-27 20:47:25
能染  不知道你用的是R-250的染色液还是G-250的  不过应该都能复染的
10楼2013-12-17 13:52:52
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