版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)

应助: 53 (初中生)
金币: 3661.4
帖子: 497
在线: 531.1小时
虫号: 938003

[交流] strep tag纯化，洗脱不下来

请教各位：
近期在做strep tag的标签蛋白纯化，GE的柱子，按产品说明书的方法进行操作，但是用2.5mM脱硫生物素（pH7.3和pH8.0）都么有蛋白被洗脱，用0.5M的NaOH进行再生时有蛋白峰被洗脱出，经SDS-PAGE检测基本确定为目的蛋白。
为什么在洗脱时么有蛋白被洗脱出，有么有改进的方法呢？

» 猜你喜欢

现代”学阀”该如何界定已经有12人回复
国社科系统bug了，是不是要放榜了？已经有10人回复
课题组招2027级博士上海工程技术大学激光智能制造方向已经有4人回复
上海工程技术大学激光智能制造课题组 2027级博士研究生招生已经有3人回复
上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告已经有11人回复
我的奶奶已经有3人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

His-tag蛋白纯化柱子洗脱液中除去咪唑的办法已经有8人回复
蛋白过镍柱纯化，在用咪唑洗脱后需要做透析，透析怎么做？？？已经有15人回复
求镍柱子纯化表达蛋白的具体步骤，注意事项！！！已经有5人回复
过硅胶柱纯化苯甲酸衍生物所用洗脱剂？已经有8人回复
GST融合蛋白洗脱时洗脱不下来，怎么办已经有9人回复
关于组氨酸标签洗脱问题已经有14人回复
蛋白纯化时目的蛋白没有洗脱下来已经有14人回复
关于镍柱纯化蛋白已经有10人回复
洗脱不下来，怎么办？已经有6人回复
关于变性条件下his-tag重组融合蛋白不结合镍柱以及部分结合镍柱情况已经有17人回复
怎样把strep标签加到重组蛋白的C端已经有3人回复
疏水层析蛋白洗不下来怎么办已经有10人回复
关于Ni-NTA纯化蛋白已经有19人回复
关于带his-tag的膜蛋白镍柱纯化已经有10人回复
去污剂在蛋白纯化中的作用已经有4人回复
【求助/交流】大孔吸附树脂纯化工艺一般使用什么溶剂洗脱？已经有10人回复
【求助】怎么将硅胶柱吸附的样品洗脱下来？已经有8人回复
【求助/交流】为什么镍柱纯化可溶性蛋白，电泳结果总是显示不纯呢？已经有9人回复
【求助/交流】镍柱纯化时，咪唑洗脱液需要调pH吗已经有7人回复
【求助/交流】镍柱纯化，洗不下来啊。。。已经有25人回复
【求助/交流】Ni柱洗脱蛋白已经有6人回复
【求助/交流】SP柱子纯化蛋白，蛋白结合后，用2M NacL都没有洗脱下来，该怎么办？已经有5人回复

1楼 2013-12-14 10:39:09

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

walking dead

金虫 (小有名气)

应助: 40 (小学生)
贵宾: 0.001
金币: 1354.8
帖子: 287
在线: 56.5小时
虫号: 4175016

★
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与

听你的陈述，目标蛋白挂柱了。只是结合较强，不易洗脱。你试试增加一下洗脱液浓度，PH稍降试试。

发自小木虫Android客户端

21楼2017-08-10 12:47:01

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 24 个回答

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

应助: 32 (小学生)
金币: 25.1
帖子: 110
在线: 42.8小时
虫号: 2825867

★ ★ ★
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-15 21:57:43

我以前用的时候是把脱硫生物素溶在buffer里面，buffer是Tris+NaCl，pH8.0。

14楼2013-12-14 12:46:35

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

简单回复

zhchzhsh20765楼

2013-12-14 11:20 回复

aofeng860308(金币+1): 谢谢参与

查看全部 24 个回答