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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » strep tag纯化，洗脱不下来
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

[交流] strep tag纯化，洗脱不下来

请教各位：
近期在做strep tag的标签蛋白纯化，GE的柱子，按产品说明书的方法进行操作，但是用2.5mM脱硫生物素（pH7.3和pH8.0）都么有蛋白被洗脱，用0.5M的NaOH进行再生时有蛋白峰被洗脱出，经SDS-PAGE检测基本确定为目的蛋白。
为什么在洗脱时么有蛋白被洗脱出，有么有改进的方法呢？
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1楼 2013-12-14 10:39:09
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aofeng860308

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-14 12:46:35
我以前用的时候是把脱硫生物素溶在buffer里面，buffer是Tris+NaCl，pH8.0。

我也是这样做的，但就是洗脱不下来！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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17楼2013-12-15 12:16:26
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zilinweizhu

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-15 21:57:43
我以前用的时候是把脱硫生物素溶在buffer里面，buffer是Tris+NaCl，pH8.0。
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14楼2013-12-14 12:46:35
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zhchzhsh20765楼
2013-12-14 11:20   回复  
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
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