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冰雪灵魂木虫 (著名写手)
食品科学家族族长
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荧光定量PCR如何进行绝对定量？ 已有2人参与
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real-time PCR 分绝对定量和相对定量，我做的是绝对定量。绝对定量需要绘制标准曲线 标曲的恒坐标是基因拷贝数的对数值 纵坐标是CT值。 问题一：跑样品得到CT值后 如何从基因浓度换算回活菌数。（我做的是要这种PCR测定干酪样品中双歧杆菌的活菌数） 问题二：用标准品做标准曲线。我的标准品就是纯培养的双歧杆菌吗？从菌体中提取DNA ? 问题三：在四楼人做的都是提rna,我看文献中写的都是提DNA，还有文献提的是将目的基因转到大肠菌的质粒中 然后再提质粒，有什么区别？ 问题四：需要特异性引物或者探针，如何设计？ |
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