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小小慧_amy

新虫 (初入文坛)

[求助] 从蛋白纯化到结晶 已有1人参与

小女子刚刚接触结构蛋白这个领域,要写一份科研计划书。想要做一个蛋白的结晶,我看文献,蛋白纯化后,还需要做一些活性中心突变,酶切位点突变才可以养晶吗?纯化后一般怎样提高蛋白的稳定性?
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st_k

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你是做蛋白复合物晶体还是只是蛋白的晶体?一般突变的是要让它失活然后和底物结合共结晶吧。
我们实验室习惯是纯度达到90%的蛋白分装储存在-80,尽量在刚解冻的状况下就点板了吧,时间太长也说不好蛋白是否稳定,我有试过放在4°冰箱两三天的蛋白再点板就重现不出结果了。
2楼2014-04-04 16:59:15
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