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小小慧_amy

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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散金: 50
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帖子: 22
在线: 16.3小时
虫号: 1679306
注册: 2012-03-10
性别: MM
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 从蛋白纯化到结晶已有1人参与

小女子刚刚接触结构蛋白这个领域，要写一份科研计划书。想要做一个蛋白的结晶，我看文献，蛋白纯化后，还需要做一些活性中心突变，酶切位点突变才可以养晶吗？纯化后一般怎样提高蛋白的稳定性？

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1楼 2013-12-08 16:20:39

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st_k

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 136.5
帖子: 9
在线: 14.3小时
虫号: 777657
注册: 2009-05-23
专业: 药物设计与药物信息

【答案】应助回帖

你是做蛋白复合物晶体还是只是蛋白的晶体？一般突变的是要让它失活然后和底物结合共结晶吧。
我们实验室习惯是纯度达到90%的蛋白分装储存在-80，尽量在刚解冻的状况下就点板了吧，时间太长也说不好蛋白是否稳定，我有试过放在4°冰箱两三天的蛋白再点板就重现不出结果了。

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