24小时热门版块排行榜    

查看: 2015  |  回复: 11

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)

[求助] 载体双酶切回收目的条带 已有3人参与

用两种酶双酶切pCI-neo载体且回收酶切完全的条带,理论上应切下22bp,酶切后跑电泳,电泳图上显示有两条条带,如图1,哪一条是酶切完全、我应该回收的条带啊?请高手指教,急!!!(DM:5000,图2是没有进行双酶切的载体)
载体双酶切回收目的条带
J%~]`%MHJ9M@6V`){7(BJUB.jpg


载体双酶切回收目的条带-1
7{6A$)[5ASKVVHR9C6OQFXI.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

深呼吸,嘴角上扬,告诉自己:我很好!!!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by tiankong很蓝 at 2013-12-03 14:47:45
但是酶切前后载体大小差别特别小...

点样的时候,marker、未酶切的载体、酶切后的一起点样。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
4楼2013-12-04 08:18:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-03 12:24:09
可以根据你的载体大小来判断。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2013-12-03 12:15:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2013-12-03 12:15:16
可以根据你的载体大小来判断。

但是酶切前后载体大小差别特别小
深呼吸,嘴角上扬,告诉自己:我很好!!!
3楼2013-12-03 14:47:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drs1998

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-01-29 16:29:08
从电泳图上看,没有完全酶切的可能性比较大,建议楼主重新酶切,否则连接转化后假阳性结果太多,会严重影响你的实验结果;如果双酶切总是出现这样的情况,建议两种酶分步进行
5楼2013-12-20 20:48:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by drs1998 at 2013-12-20 20:48:46
从电泳图上看,没有完全酶切的可能性比较大,建议楼主重新酶切,否则连接转化后假阳性结果太多,会严重影响你的实验结果;如果双酶切总是出现这样的情况,建议两种酶分步进行

您说的我都有做,但结果都差不多,您觉得延长双酶切时间怎么样,延长至20h?
深呼吸,嘴角上扬,告诉自己:我很好!!!
6楼2013-12-25 22:11:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weishengsu5

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

22bp,直接上柱子回收就行,干嘛切胶

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2013-12-25 22:14:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by weishengsu5 at 2013-12-25 22:14:53
22bp,直接上柱子回收就行,干嘛切胶

我要的是除去22bp之后的,实验条件限制呗-只能切胶
深呼吸,嘴角上扬,告诉自己:我很好!!!
8楼2013-12-26 10:23:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weishengsu5

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by tiankong很蓝 at 2013-12-26 10:23:00
我要的是除去22bp之后的,实验条件限制呗-只能切胶...

酶切产物直接用回收试剂盒回收就可以了,22bp的条带吸附柱子的能力小,是回收不回来的,
9楼2013-12-26 12:59:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王者归来001

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以把切好的两个条带分别回收了吧,分别连看看。关键是你的条带太小了吧,才22bp?
坚持不懈,终会成功!
10楼2013-12-26 13:39:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tiankong很蓝 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见