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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 双酶切后，对载体进行回收，而目的基因不回收，可以直接酶连么？
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zhangzhilai

金虫 (正式写手)

[求助] 双酶切后，对载体进行回收，而目的基因不回收，可以直接酶连么？

双酶切后，由于目的基因条带回收不回来，打算直接进行酶连，但是只对载体片段进行回收，这样可以么？
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1楼 2012-11-28 15:00:55
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的目的是什么？
双酶切不就是为了获得载体么？基因应该是PCR回收的啊。
等两种都回收了就可以连接了。
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2楼2012-11-28 15:30:41
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FiFily

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
目的片段若不回收 里面有些残存的杂质 或者内切酶都会影响连接效率
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3楼2012-11-28 15:37:48
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
目的基因最好也回收。你说回收不回来是什么意思？实在不能回收的话，如果目的基因所用的酶可以加热失活的话，失活后直接连也可能成功。祝好运。
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4楼2012-11-29 07:40:45
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果你能确定酶切完全了，是可以的。但是不建议这么做，因为很难控制目的片段的存在，虽然你说回收不回来。
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5楼2012-11-29 08:27:55
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主可以用DNA纯化试剂盒纯化一下，然后再酶连。。。
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keepon
6楼2012-11-29 08:42:05
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zhangzhilai

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-29 08:42:05
楼主可以用DNA纯化试剂盒纯化一下，然后再酶连。。。

恩，这个我也试过，但是由于条带比较暗，老是回收不回来，所以才考虑直接酶连的。
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7楼2012-11-29 09:38:15
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