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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR的可重复性
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hospitals

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR的可重复性 已有4人参与

最近，做实验出现了特别诡异的事件，之前PCR扩增很是顺利，中间出差一周后再换了新溶的引物，就怎么也扩不出来了。
这期间，DNA检测没有问题，浓度在27-30ng/ul之间，260/280值在1.7-1.9之间；稀释了DNA到10倍，50倍，100倍；引物是新的，别人也试过，引物没有问题；PCRmix也是新的，也换过牌子；换过PCR仪；换过操作的人.......
真是百思不得其解啊，望高人指点迷津啊，不甚感激！

此外，我在N篇文献上找到别人扩增的引物和PCR条件，引物都是通用的，结果用到自己的实验上就总是没有结果，实验一再的在重复重复，无望中~~~
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1楼 2013-11-29 09:57:14
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zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-30 22:32:45
更换模板试试，还有就是DNA保存要使用TE保存，最后在-20℃。一般水溶的DNA，很容易降解，特别是室温保存的水溶DNA，三四天都降解的差不多了。希望对你有所帮助
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8楼2013-11-30 14:18:27
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