24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 14753  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dirkyoung

金虫 (正式写手)

[求助] western的转膜液配方

最近做大蛋白western遇到一点点问题,于是在网上发现了两种转膜液配方。
配方一:Tris 5.8g,甘氨酸 2.9g,SDS 0.376g
配方二:Tris 3.05g,甘氨酸 14.4g
甲醇都是200ml,然后1L定容。
方案二是我们实验室一直在用的,当然会加极少量的SDS,对于100kd一下的蛋白没有问题,200kd以下的勉强能行,200kd以上的之前没人做过,我做了不行。那么这两个配方里甘氨酸为什么差别会这么大呢?或者说这两种方案各有什么适用范围?
另外我还看到说调整甲醇和SDS的含量对于大蛋白的电转有帮助,不知是否如此。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

施子墨

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dirkyoung: 金币+20 2013-11-28 14:08:54
我用的是配方一~
没问题的
5楼2013-11-27 15:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

zhaoxr0311

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
转膜液不加SDS吧,如果蛋白大的话,可以采用湿转啊,效果好些!
2楼2013-11-27 10:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dirkyoung

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaoxr0311 at 2013-11-27 10:41:39
转膜液不加SDS吧,如果蛋白大的话,可以采用湿转啊,效果好些!

我只有做湿转的条件。我主要问的是这两配方有什么区别,甘氨酸有什么作用。是不是一个湿转,一个半干转的?
3楼2013-11-27 10:46:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dirkyoung: 金币+30, 有帮助 2013-11-28 14:08:51
tris和甘氨酸形成缓冲体系,维系体系的pH。我一直用的是配方一。SDS可以增加蛋白的负电性,调高疏水性蛋白的转膜效果。
4楼2013-11-27 12:40:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 申博/考博 +3 啃面包的小书虫 2026-04-17 4/200 2026-04-17 23:54 by 阳阳阳^_^
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +10 否极泰来2026 2026-04-15 12/600 2026-04-17 17:54 by mapenggao
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-16 15:18 by jiahl2024
[考研] 297,工科调剂?河南农业大学本科 +14 河南农业大学-能 2026-04-14 14/700 2026-04-16 14:41 by dingyanbo1
[考研] 药学求调剂 +14 喽哈加油 2026-04-14 16/800 2026-04-16 10:15 by beilsong20
[考研] 290调剂生物0860 +38 哇哈哈,。 2026-04-11 44/2200 2026-04-16 09:52 by cuisz
[考研] 297,工科调剂? +10 河南农业大学-能 2026-04-14 10/500 2026-04-15 21:50 by noqvsozv
[考研] 药学305求调剂 +7 玛卡巴卡boom 2026-04-11 7/350 2026-04-15 13:21 by 西北望—风沙
[考研] 考研调剂 +13 长弓傲 2026-04-13 14/700 2026-04-14 14:44 by zs92450
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] 0831一轮调剂失败求助 +10 小熊睿睿_s 2026-04-11 10/500 2026-04-12 22:43 by 长弓傲
[考研] 一志愿浙大生物325分求调剂 +9 zysheng 2026-04-12 9/450 2026-04-12 22:31 by yuyin1233
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[考研] 一志愿厦大0856,306求调剂 +15 Bblinging 2026-04-11 15/750 2026-04-11 22:53 by 314126402
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
信息提示
请填处理意见