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oldrabbit01

新虫 (初入文坛)

[求助] 细菌基因组中为什么会有多个16srDNA片段?

最近用细菌16srDNA通用引物(338f/518r)做DGGE,结果在一个泳道中出现多条假单胞菌条带,很奇怪,怀疑是非特异性扩增。因此,拿这对引物(338f/518r)到NCBI与假单胞菌基因组比对一下,结果发现许多株假单胞菌基因组中有很多区域有16srDNA基因序列,在下十分疑惑,不知道是断裂基因呢?还是这个基因有多拷贝?如果说是断裂基因,据我所知,细菌基因一般不是连续的吗?如果是多拷贝基因,可是每一区域的16srDNA基因序列都有一定差异。请大侠指教。
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wangl2037

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们以前用DGGE研究酒窖泥微生物多样性,也是这样的,你跑完了,去NCBI上对比一下同源性就知道了,本身有些菌就是有多个16S rDNA的。我们当时通用引物是在几组里面挑的,用的不同的,从总DNA中扩出来的条带数也不一样。

ps:5楼的朋友,他应该是跑了pcr产物的。感觉楼主的意思是,回收胶里面的分子量是一样,他觉得跑DGGE一个点样孔里面出来的条带就应该跟跑琼脂胶一样只出现一条带=。= 目测是原理没搞清楚~
9楼2013-11-18 13:43:23
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
16S rRNA gene里有保守区,也有可变区的,楼主的带差异应该不大吧
2楼2013-11-16 09:17:30
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oldrabbit01

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2013-11-16 09:17:30
16S rRNA gene里有保守区,也有可变区的,楼主的带差异应该不大吧

无语
3楼2013-11-16 15:00:48
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oldrabbit01

新虫 (初入文坛)

所答非所问,如果不懂就不要乱说。
4楼2013-11-16 15:04:04
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