应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 5780  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

七八月的阳光

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题 已有1人参与

目前在做蛋白亚细胞定位，连的GFP，用的拟南芥原生质体转化，在共聚焦显微镜下观察。

如图中的观察结果，有些质粒看不到明显的GFP荧光，但是有一些与叶绿体背景相当，或者稍强于叶绿体背景的环状荧光信号。请问这些是转化的质粒的GFP信号吗。做了很多质粒，golgi、TGN等的信号都还不错，但至今没有得到质粒的液泡膜信号。有些质粒是已被验证过的液泡膜定位，但在我的实验中也没有观察到强的GFP信号，最多就是图片中的强度。请问，图片中的环状信号是背景，还是我的质粒的信号呢。
共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题
9-5.jpg


共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题-1
7-2.jpg


共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题-2
7-7-2.jpg


共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题-3
9-1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-11-12 12:03:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Njau-123

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by dfl204 at 2013-11-14 15:45:29
叶绿体的自发荧光可以设置成其它的颜色。另外建议使用已知蛋白Marker-RFP进行共转。

叶绿体自发荧光怎么去除，
赞一下 回复此楼
9楼2018-05-07 20:13:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

starseacow

无虫

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
七八月的阳光: 金币+1, ★有帮助 2013-11-12 18:00:11
最好找更典型的照片，不过我感觉是在液泡上表达的，譬如9-1的右上角。另外，可以找一些液泡标记蛋白作个对照。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2013-11-12 17:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七八月的阳光

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-11-12 17:33:39
最好找更典型的照片，不过我感觉是在液泡上表达的，譬如9-1的右上角。另外，可以找一些液泡标记蛋白作个对照。

如果就这样的荧光强度，能够和液泡膜的marker重叠，就能证明是定位在液泡膜吗？
我做的其他定位在golgi等的质粒，GFP荧光就特别强，完全可以忽略叶绿体的背景，不知道为什么做液泡膜的就得不到强的荧光？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-11-12 18:04:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

禁虫
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-12 19:13:47
引用回帖:
3楼: Originally posted by 七八月的阳光 at 2013-11-12 18:04:47
如果就这样的荧光强度，能够和液泡膜的marker重叠，就能证明是定位在液泡膜吗？
我做的其他定位在golgi等的质粒，GFP荧光就特别强，完全可以忽略叶绿体的背景，不知道为什么做液泡膜的就得不到强的荧光？...

一方面，和marker重叠，另一方面，最好找比较典型的细胞，譬如上面我提到的9-1，这样的结果基本上就可以说明问题了，如果条件允许，最好再做个western blot验证蛋白表达。荧光强度不强，如果排除实验步骤问题，这可能和你所标记的蛋白性质有关。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2013-11-12 18:41:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 324分 085600材料与化工 +9 呆鹅oor 2026-03-27 9/450 2026-04-01 00:46 by fmesaito
[考研] 材料专硕306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-31 3/150 2026-04-01 00:39 by fmesaito
[考研] 267求调剂 +9 uiybh 2026-03-31 9/450 2026-03-31 22:15 by 天倌赐福
[考研] 375求调剂 +7 雨夏整夜 2026-03-29 7/350 2026-03-31 18:52 by xhai2011
[考研] 本2一志愿C9-333分，材料科学与工程，求调剂 +9 升升不降 2026-03-31 9/450 2026-03-31 18:01 by 无际的草原
[考研] 286分调剂 +11 Faune 2026-03-30 13/650 2026-03-31 17:28 by michael2011
[考研] 一志愿武汉理工，总分321，英一数二，求老师收留。 +12 nnnnnnn5 2026-03-25 12/600 2026-03-31 16:21 by 记事本2026
[考研] 0703化学 +20 妮妮ninicgb 2026-03-27 20/1000 2026-03-31 13:33 by 无际的草原
[考研] 调剂310 +13 温柔的晚安 2026-03-25 14/700 2026-03-31 13:03 by 记事本2026
[考研] 0703一志愿9，初试成绩：338，四六级已过，有科研经历，求调剂！ +7 Zuhui0306 2026-03-25 7/350 2026-03-30 19:01 by 源_2020
[考研] 298求调剂 +3 什么是胖头鱼 2026-03-30 5/250 2026-03-30 14:41 by 青海小西牛
[考研] 085602 化学工程专硕 340分求调剂 +4 qianbai11 2026-03-29 4/200 2026-03-30 11:34 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +4 邱gl 2026-03-26 7/350 2026-03-30 08:39 by 探123
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +4 IceGuo 2026-03-26 5/250 2026-03-29 01:25 by griffith2014
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 一志愿吉大071010，316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭