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七八月的阳光

铜虫 (初入文坛)

[求助] 共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题 已有1人参与

目前在做蛋白亚细胞定位,连的GFP,用的拟南芥原生质体转化,在共聚焦显微镜下观察。

如图中的观察结果,有些质粒看不到明显的GFP荧光,但是有一些与叶绿体背景相当,或者稍强于叶绿体背景的环状荧光信号。请问这些是转化的质粒的GFP信号吗。做了很多质粒,golgi、TGN等的信号都还不错,但至今没有得到质粒的液泡膜信号。有些质粒是已被验证过的液泡膜定位,但在我的实验中也没有观察到强的GFP信号,最多就是图片中的强度。请问,图片中的环状信号是背景,还是我的质粒的信号呢。
共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题
9-5.jpg


共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题-1
7-2.jpg


共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题-2
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共聚焦显微镜-GFP液泡膜定位问题-3
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Njau-123

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by dfl204 at 2013-11-14 15:45:29
叶绿体的自发荧光可以设置成其它的颜色。另外建议使用已知蛋白Marker-RFP进行共转。

叶绿体自发荧光怎么去除,
9楼2018-05-07 20:13:54
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