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落叶沙沙

金虫 (初入文坛)

[交流] 荧光标记蛋白一般固定在什么载体上，可用激光共聚焦显微镜检测？

各位大侠，学化学的想请教一下，一般用什么荧光素来标记蛋白，比如说BSA？荧光标记的蛋白一般固定在什么载体上来检测？是不是任何载体上的荧光标记蛋白都可以用激光共聚焦显微镜检测到？谢谢大家啦……
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1楼 2012-05-29 10:39:43
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落叶沙沙

金虫 (初入文坛)
第二个问题是：荧光标记蛋白一般固定在什么材料上来检测？
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2楼2012-05-29 10:52:37
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quiller2000

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+2, 管理局 2012-05-29 19:00:57
西瓜: , 鼓励交流！打错字，抱歉…… 2012-05-29 19:01:15
可以的，你如果是BSA一类的，不想做融合表达的话，可以直接修饰后连在量子点上。载体？不是说的质粒吧？

可以点到膜上面看，也可以用一些半固体混匀后看。液体的话，如果颗粒太小了，运动会很快，需要高速成像
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3楼2012-05-29 12:03:57
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落叶沙沙

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by quiller2000 at 2012-05-29 12:03:57
可以的，你如果是BSA一类的，不想做融合表达的话，可以直接修饰后连在量子点上。载体？不是说的质粒吧？

可以点到膜上面看，也可以用一些半固体混匀后看。液体的话，如果颗粒太小了，运动会很快，需要高速成像

是材料，比如说化学修饰的玻璃片，或者膜一类的物质？目的是将荧光标记后的蛋白吸附在材料表面来检测。一般是用哪些材料呢？
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4楼2012-05-29 14:42:19
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enya216

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+3, Good！欢迎常来哈 2012-05-29 19:01:30
蛋白一般用抗原抗体的方法检测，比如BSA可以先连接对应的一抗，然后连接带有荧光素的二抗。至于荧光素的选择，要根据实验需要，如果没有干扰什么的，那就随便啦，比如FITC啊，cy3啊，delight649啦，都可以的。
激光共聚焦对载体没要求的。一般用盖玻片或者载玻片都可以，如果是低倍数观察，盖玻片就足够了。如果是高倍数的油镜，就必须用盖玻片。将你的样品点在玻片上就可以观察。
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5楼2012-05-29 17:54:04
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quiller2000

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-29 19:01:39
因为不知道你的实验目的，所以难以回答，一般带负电荷的是不是都可以啊~和蛋白质的氨基结合的！
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6楼2012-05-29 18:31:23
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su2312368

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
荧光标记常用的是FITC和TRITC荧光素，后者更加稳定点
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7楼2013-01-16 09:48:45
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懒懒呢

金虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by enya216 at 2012-05-29 17:54:04
蛋白一般用抗原抗体的方法检测，比如BSA可以先连接对应的一抗，然后连接带有荧光素的二抗。至于荧光素的选择，要根据实验需要，如果没有干扰什么的，那就随便啦，比如FITC啊，cy3啊，delight649啦，都可以的。
激光 ...

你好！我想请问下，如果是观察生物的荧光标记，前处理步骤也是一样的吗
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8楼2017-12-26 16:42:05
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