24小时热门版块排行榜    

查看: 1713  |  回复: 4

blueskylei

木虫 (正式写手)

[求助] 用荧光倒置显微镜怎样进行荧光蛋白的定量检测

要在微流控芯片中进行荧光蛋白的定量检测,用荧光倒置显微镜怎样进行定量检测呢,请各位大侠支招啊!
回复此楼
幸福在于不断追求!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzhwin

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

blueskylei(金币+1): 谢谢 2011-10-12 10:26:03
我们做实验,一般不会对荧光蛋白进行定量,如果要定量可能酶标仪会更好一些,荧光显微镜通过标定荧光强度的方法非常不准
2楼2011-10-11 14:29:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blueskylei

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lzhwin at 2011-10-11 14:29:01:
我们做实验,一般不会对荧光蛋白进行定量,如果要定量可能酶标仪会更好一些,荧光显微镜通过标定荧光强度的方法非常不准

荧光显微镜通过标定荧光强度的方法是怎么做的呢?请详细介绍下
幸福在于不断追求!
3楼2011-10-11 19:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzhwin

木虫 (正式写手)

★ ★
西湖醉鱼(金币+2): 欢迎常来 2011-10-12 20:28:44
引用回帖:
3楼: Originally posted by blueskylei at 2011-10-11 19:32:47:
荧光显微镜通过标定荧光强度的方法是怎么做的呢?请详细介绍下

我不知道你的样品到底是什么东西。
我们在荧光显微镜下看的一般都是表达了荧光蛋白的细胞,用相同条件的条件对细胞进行拍照,然后将得到的荧光照片用显微镜自带的软件进行选择,就软件就会读出选择位置的灰度值,这个就是荧光强度了,如果你的显微镜是进口四大品牌中的一个那肯定有这个功能,请自己打电话向工程师咨询。如果不是,很多软件也有这个功能比如IPP IPI  imageJ(这个是免费的)。

强烈不建议这么做,不知道你到底想做什么,想定量我们更倾向于测luciferase或者GUS的酶活,这个会准很多。
如果一定要测请注意几点:
1、条件一定要一致(ccd增益、曝光时间、激发光强度等等)
2、最好能有正负对照,正对照用于确定线性最高点,负对照用来扣除本底。
4楼2011-10-12 16:27:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jx19891116

银虫 (小有名气)

您好,我现在也在用荧光倒置显微镜对荧光蛋白进行定量分析,看到你的贴子,请问,你的这个问题是怎么解决的?我们的仪器是国产的,仪器没有自带转换灰度值的功能,如果要用IPP,Image J等软件怎么处理?谢谢!
5楼2014-12-10 08:48:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 blueskylei 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料化工调剂 +8 今夏不夏 2026-03-01 9/450 2026-03-01 13:25 by yc258
[考研] 290求调剂 +8 材料专硕调剂; 2026-02-28 9/450 2026-03-01 12:46 by 闭眼看蓝天
[考研] 0856化工专硕求调剂 +6 董boxing 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:45 by houyaoxu
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 材料类求调剂 +8 wana_kiko 2026-02-28 8/400 2026-03-01 11:44 by 王伟要上岸啊
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业,申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-02-28 5/250 2026-03-01 08:49 by ms629
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见