| 查看: 2581 | 回复: 14 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
514278815木虫 (小有名气)
|
[求助]
原核表达蛋白复性的具体方案
|
||
|
原核表达复性做了一个月了，纯出来的量很少，希望虫友们给点建议吧，最好有详细的步骤； 由于需要的蛋白量较大，我才用的是柱复性；包涵体超声破碎后，用洗涤液洗好后重溶到含8M尿素的缓冲液中；复性采用梯度复性8M-2M的梯度在superdex-75上复性；复性后进行透析，透析时出现沉淀，开始怀疑透析梯度大过快了，就采用柱上缓慢换液，发现换液效果不好，真正到达目的缓冲液的蛋白很少；怀疑蛋白在柱子上析出来了。希望虫友给些建议吧，目前怀疑蛋白复性效果不佳，希望能给一个合理的柱上复性方案 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白质生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有134人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 原核上清表达条件
已经有6人回复
- 原核表达只能在沉淀中检测出目标蛋白怎么办
已经有9人回复
- 原核表达蛋白时标签无论在N端还是C端蛋白折叠时都被折进去了，怎么办
已经有18人回复
- 原核表达 蛋白质全在沉淀里，这是怎么回事啊
已经有12人回复
- 蛋白表达不出来，是什么原因造成的
已经有7人回复
- 原核表达载体蛋白诱导
已经有18人回复
- 原核表达蛋白变小
已经有4人回复
- 原核表达，蛋白活性问题
已经有12人回复
- 透析 蛋白沉淀 复性
已经有22人回复
- 做过跨膜蛋白原核表达的战友过来看看哦
已经有18人回复
- 原核表达形成了包涵体怎么办啊？
已经有22人回复
- pET-28a原核不能表达目的蛋白
已经有17人回复
- pet30a原核表达蛋白大小问题
已经有4人回复
- 关于用Ni-NTA His.bind树脂纯化原核表达蛋白
已经有16人回复
- 原核表达蛋白诱导不出来
已经有16人回复
- 原核表达系统不表达目的蛋白
已经有8人回复
- 【求助/交流】如何让一个蛋白在原核细胞中表达
已经有3人回复
- 【求助/交流】离子交换纯化原核表达蛋白
已经有15人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
514278815
木虫 (小有名气)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 2857.6
- 散金: 200
- 红花: 3
- 帖子: 137
- 在线: 107.2小时
- 虫号: 2458441
- 注册: 2013-05-10
- 性别: GG
- 专业: 抗体工程学
5楼2013-11-02 17:36:58
shenlin0514
木虫 (正式写手)
无名小虫
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 3197.3
- 散金: 897
- 红花: 3
- 帖子: 810
- 在线: 100.3小时
- 虫号: 299250
- 注册: 2006-11-25
- 性别: GG
- 专业: 免疫学研究新技术与新方法
2楼2013-11-01 10:33:59
514278815
木虫 (小有名气)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 2857.6
- 散金: 200
- 红花: 3
- 帖子: 137
- 在线: 107.2小时
- 虫号: 2458441
- 注册: 2013-05-10
- 性别: GG
- 专业: 抗体工程学
3楼2013-11-01 19:55:16
4楼2013-11-02 16:40:32
