应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 工艺研究 » 原核上清表达条件
71/1返回列表
查看: 1216  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

落满夏天

银虫 (正式写手)

[交流] 原核上清表达条件

有没有高手做过原核的上清表达，请问是从发酵上控制参数还是从菌种构建上下功夫，另外疏水性强的蛋白是不是只能做包涵体表达？小弟这块比较薄弱，感激不尽。

[ Last edited by 落满夏天 on 2013-10-14 at 12:13 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-10-14 12:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tigerwei

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
首先从质粒构建开始，疏水性强的蛋白也可能上清表达。
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-14 12:58:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落满夏天

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tigerwei at 2013-10-14 12:58:52
首先从质粒构建开始，疏水性强的蛋白也可能上清表达。

需要信号肽吗？
回复此楼
3楼2013-10-15 08:08:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushm388

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
原核分泌表达，信号肽是必须的，疏水性强的蛋白可尝试添加标签蛋白，如GST融合表达。
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-15 11:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tigerwei

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 落满夏天 at 2013-10-15 08:08:35
需要信号肽吗？...

信号肽或其它类似功能序列。
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-24 09:27:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古月问你哦

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果是原核分泌表达还是做真核蛋白表达吧，原核不适合做分泌表达信号肽对原核系统来说会导致可溶性差上清基本不出现，真核系统做个瞬时转染也很简单只是表达的量少
赞一下 回复此楼
6楼2015-11-05 13:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhczj

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
通常是从上游构建上下功夫，能够从根本上解决问题，通过发酵控制上能够解决，但也不绝对，相对付出的要大一些，另外看你干什么用，通常会需要对标签进行切割，这样会损失收率。如果解决不了包涵体也是一种选择，毕竟表达的蛋白量大，即使复性后蛋白量还是蛮大的。
赞一下 回复此楼
7楼2015-11-13 14:46:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 落满夏天 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭