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原核上清表达条件
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落满夏天
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[交流]
原核上清表达条件
有没有高手做过原核的上清表达,请问是从发酵上控制参数还是从菌种构建上下功夫,另外疏水性强的蛋白是不是只能做包涵体表达?小弟这块比较薄弱,感激不尽。
[
Last edited by 落满夏天 on 2013-10-14 at 12:13
]
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2013-10-14 12:06:20
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如果是原核分泌表达还是做真核蛋白表达吧,原核不适合做分泌表达信号肽对原核系统来说会导致可溶性差上清基本不出现,真核系统做个
瞬时转染
也很简单只是表达的量少
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6楼
2015-11-05 13:59:14
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tigerwei
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首先从质粒构建开始,疏水性强的蛋白也可能上清表达。
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2楼
2013-10-14 12:58:52
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落满夏天
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2楼
:
Originally posted by
tigerwei
at 2013-10-14 12:58:52
首先从质粒构建开始,疏水性强的蛋白也可能上清表达。
需要信号肽吗?
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3楼
2013-10-15 08:08:35
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wushm388
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原核分泌表达,信号肽是必须的,疏水性强的蛋白可尝试添加标签蛋白,如GST融合表达。
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4楼
2013-10-15 11:29:59
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