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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 工艺研究 » 原核上清表达条件
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落满夏天

银虫 (正式写手)

[交流] 原核上清表达条件

有没有高手做过原核的上清表达，请问是从发酵上控制参数还是从菌种构建上下功夫，另外疏水性强的蛋白是不是只能做包涵体表达？小弟这块比较薄弱，感激不尽。

[ Last edited by 落满夏天 on 2013-10-14 at 12:13 ]
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1楼 2013-10-14 12:06:20
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lhczj

金虫 (小有名气)
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通常是从上游构建上下功夫，能够从根本上解决问题，通过发酵控制上能够解决，但也不绝对，相对付出的要大一些，另外看你干什么用，通常会需要对标签进行切割，这样会损失收率。如果解决不了包涵体也是一种选择，毕竟表达的蛋白量大，即使复性后蛋白量还是蛮大的。
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7楼2015-11-13 14:46:41
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tigerwei

木虫 (小有名气)
★
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首先从质粒构建开始，疏水性强的蛋白也可能上清表达。
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2楼2013-10-14 12:58:52
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落满夏天

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tigerwei at 2013-10-14 12:58:52
首先从质粒构建开始，疏水性强的蛋白也可能上清表达。

需要信号肽吗？
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3楼2013-10-15 08:08:35
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wushm388

银虫 (小有名气)
★
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原核分泌表达，信号肽是必须的，疏水性强的蛋白可尝试添加标签蛋白，如GST融合表达。
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4楼2013-10-15 11:29:59
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