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原核上清表达条件
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落满夏天
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[交流]
原核上清表达条件
有没有高手做过原核的上清表达,请问是从发酵上控制参数还是从菌种构建上下功夫,另外疏水性强的蛋白是不是只能做包涵体表达?小弟这块比较薄弱,感激不尽。
[
Last edited by 落满夏天 on 2013-10-14 at 12:13
]
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lhczj
金虫
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通常是从上游构建上下功夫,能够从根本上解决问题,通过发酵控制上能够解决,但也不绝对,相对付出的要大一些,另外看你干什么用,通常会需要对标签进行切割,这样会损失收率。如果解决不了包涵体也是一种选择,毕竟表达的蛋白量大,即使复性后蛋白量还是蛮大的。
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7楼
2015-11-13 14:46:41
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tigerwei
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首先从质粒构建开始,疏水性强的蛋白也可能上清表达。
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2楼
2013-10-14 12:58:52
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落满夏天
银虫
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2楼
:
Originally posted by
tigerwei
at 2013-10-14 12:58:52
首先从质粒构建开始,疏水性强的蛋白也可能上清表达。
需要信号肽吗?
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3楼
2013-10-15 08:08:35
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wushm388
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原核分泌表达,信号肽是必须的,疏水性强的蛋白可尝试添加标签蛋白,如GST融合表达。
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4楼
2013-10-15 11:29:59
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