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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 同一程序和体系pcr有时会扩增出目的片段有时没有,原因是什么
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朵朵VS果果

铁虫 (初入文坛)

[求助] 同一程序和体系pcr有时会扩增出目的片段有时没有,原因是什么

片段为3000左右，也用了La酶啊，就是p不出来
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1楼2013-10-30 14:22:31
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wanghx_2012

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-30 15:37:21
你是加的DNA模板还是进行的菌落PCR？
建议额外添加Mg离子2.5-3微，你再试试看。
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2楼2013-10-30 15:00:02
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710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-30 22:46:47
说明你的PCR体系还不是很稳定，可以适当的优化一下，要不就是加样的问题，加样的时候要是加的少的东西一定要看吸没吸出来加没加进去
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may
3楼2013-10-30 15:46:12
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deguohan

至尊木虫 (职业作家)

教授、博/硕导

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-10-30 22:46:56
试验中的PCR体系不稳定，可适当的优化，也可巢式一下试试
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天道酬勤，厚德载物
4楼2013-10-30 16:40:39
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zhouxiaofei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
操作问题？还是你的模版浓度不太稳定？
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5楼2013-10-31 09:23:35
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