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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 各位大侠，PCR扩增以水为模版也能扩出挑带来的原因有？
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

[求助] 各位大侠，PCR扩增以水为模版也能扩出挑带来的原因有？

最近在做突变体的鉴定工作，Soutern blot\ TAIL PCR确定随机插入拷贝数及破坏的序列后，设计特异引物扩增确定了基因组序列片段的缺失。但用cDNA为模板扩增时，以水和突变体cDNA、wt为模板时，都能扩出目的条带来，请问各位虫友遇到过类似的情况吗？
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jiayoubashaonian
1楼 2011-11-21 19:26:44
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bioplant

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

blackrose8089(金币+3): 多谢bioplant 2011-11-21 20:03:37
碰到如此诡异的事情首先就是实验室大清洁：实验室存在气溶胶污染，或者移液器存在污染。
换一个实验室，同时换一套移液器和PCR用的水、dNTP有助于判断问题处在那里。
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2楼2011-11-21 20:02:01
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-11-21 20:55:03
blackrose8089(金币+3): 水是没问题的，做其他的PCR阴性对照没问题，可能是引物，正在重合成！ 2011-11-22 12:34:22
气溶胶污染，建议先加阴性对照反应，再做其他的。如果还是不行有可能是水被污染了。
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
3楼2011-11-21 20:24:12
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)
估计是水污染了
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4楼2011-11-21 20:41:03
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jzyzqbx

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

blackrose8089(金币+3): 谢谢jzyzqbx ，正在排除！ 2011-11-22 12:33:29
气溶胶污染或者水污染，你的酶和dNTP,buffer是公用的吗，也有可能是枪和枪头
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5楼2011-11-22 10:28:02
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