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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物电泳，marker正常，样品比预期的跑得快
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kehan777

木虫 (小有名气)

[求助] PCR产物电泳，marker正常，样品比预期的跑得快

500~600bp的PCR产物，我跑了两块胶，一块小胶（点5μl）做鉴定用，一块大胶（剩余的点45μl一起）做打算做胶回收
电泳结果：两个marker正常，小胶跑出了预期条带，条带在500偏上；
大胶却是在400左右。请问有没有人遇到这种情况？
凝胶是同一时间配置的，一起跑的电泳，marker正常。。
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1楼 2013-10-29 21:28:51
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liyongliangx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-29 23:55:09
以前遇到过，当天P出来然后，跑胶结果正确 ，回收后第二天再跑发现条带又没了。。

所以可能还是没有P 出来
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2楼2013-10-29 21:37:29
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小虫友

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-29 23:55:19
感觉浓度高了，跑电泳时条带会更靠前些
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3楼2013-10-29 21:56:30
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kehan777

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小虫友 at 2013-10-29 21:56:30
感觉浓度高了，跑电泳时条带会更靠前些

胶孔大小、PCR产物含有的体系成分，DNA的加入量，胶的厚度...这些因素不知道是哪个影响..
PCR产物电泳，marker正常，样品比预期的跑得快
2.png


PCR产物电泳，marker正常，样品比预期的跑得快-1
1.png
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4楼2013-10-30 09:12:32
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小虫友

金虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-31 13:10:39
引用回帖:
4楼: Originally posted by kehan777 at 2013-10-30 09:12:32
胶孔大小、PCR产物含有的体系成分，DNA的加入量，胶的厚度...这些因素不知道是哪个影响..

2.png

1.png
...

通过marker拉开距离第一张图跑的时间要比第二张长，有时这个也会影响条带与marker的相对距离。不过你第一张图里有个孔出现了两条带，你第二张的那个条带会不会是切的那个小条带呀
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5楼2013-10-31 09:04:32
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