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kehan777

木虫 (小有名气)

[求助] PCR产物电泳,marker正常,样品比预期的跑得快

500~600bp的PCR产物,我跑了两块胶,一块小胶(点5μl)做鉴定用,一块大胶(剩余的点45μl一起)做打算做胶回收
电泳结果:两个marker正常,小胶跑出了预期条带,条带在500偏上;
大胶却是在400左右。请问有没有人遇到这种情况?
凝胶是同一时间配置的,一起跑的电泳,marker正常。。
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liyongliangx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-29 23:55:09
以前遇到过,当天P出来然后,跑胶结果正确 ,回收后第二天再跑发现条带又没了。。

所以可能还是没有P 出来
2楼2013-10-29 21:37:29
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小虫友

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-29 23:55:19
感觉浓度高了,跑电泳时条带会更靠前些
3楼2013-10-29 21:56:30
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kehan777

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小虫友 at 2013-10-29 21:56:30
感觉浓度高了,跑电泳时条带会更靠前些

胶孔大小、PCR产物含有的体系成分,DNA的加入量,胶的厚度...这些因素不知道是哪个影响..
PCR产物电泳,marker正常,样品比预期的跑得快
2.png


PCR产物电泳,marker正常,样品比预期的跑得快-1
1.png

4楼2013-10-30 09:12:32
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小虫友

金虫 (小有名气)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-31 13:10:39
引用回帖:
4楼: Originally posted by kehan777 at 2013-10-30 09:12:32
胶孔大小、PCR产物含有的体系成分,DNA的加入量,胶的厚度...这些因素不知道是哪个影响..

2.png

1.png
...

通过marker拉开距离第一张图跑的时间要比第二张长,有时这个也会影响条带与marker的相对距离。不过你第一张图里有个孔出现了两条带,你第二张的那个条带会不会是切的那个小条带呀
5楼2013-10-31 09:04:32
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