应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 表达小分子蛋白有什么技巧
171/2返回列表12下一页
查看: 2469  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sweet561

银虫 (小有名气)

[交流] 表达小分子蛋白有什么技巧 已有11人参与

目前，正在用真核表达载体pPIC9K表达胰岛素基因，由于目的基因较小，蛋白分子量只有6.3KD，用SDS-PAGE电泳跑胶都比较弥散，看不出目的蛋白是否表达，希望各位能给予帮助，有什么好的方法，谢谢！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-29 11:05:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wanghx_2012

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-30 22:51:40
蛋白分子量太小，低于14KD的蛋白在普通SDS-PAGE上就很难看跑好了，可以使用Tricine-SDS-PAGE,或则连接报道基因（GFP），再进行检测就方便了。
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2013-10-30 15:15:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shyh1983

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-30 00:04:53
对于10kd以下的蛋白的电泳检测，要想得到好的结果，最好使用Tricine-SDS-PAGE进行检测。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-10-29 16:35:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyt7638

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-30 22:51:47
Tricine-SDS-PAGE或20%的普通SDS-PAGE，电压要低30V   80V。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2013-10-30 14:19:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinl03

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
融合到可溶性蛋白比如gst,mbp蛋白标签表达，中间加个intein，表达后诱导从intein切掉标签蛋白，就可以得到你的小蛋白

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2013-11-01 12:41:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

wuyao0513

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-30 00:04:58
可以调整胶的配制啊，选择更小的maker
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-29 11:46:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sweet561

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shyh1983 at 2013-10-29 16:35:47
对于10kd以下的蛋白的电泳检测，要想得到好的结果，最好使用Tricine-SDS-PAGE进行检测。

我也看到有文章用Tricine-SDS-PAGE进行检测，请问你用过此方法吗，能把具体的缓冲液及制胶方法说一下吗，谢谢！
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-30 08:48:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shyh1983

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by sweet561 at 2013-10-30 08:48:16
我也看到有文章用Tricine-SDS-PAGE进行检测，请问你用过此方法吗，能把具体的缓冲液及制胶方法说一下吗，谢谢！...

你给个邮箱账号，我发给你。
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-30 10:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sweet561

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by shyh1983 at 2013-10-30 10:58:35
你给个邮箱账号，我发给你。...

邮箱：sweet561@163.com，非常感谢！
赞一下 回复此楼
6楼2013-10-30 11:37:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangpeng227

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看你干什么用了，要是带上个大一点的标签，比如GFP啥的，分子量大一点就好操作了。
赞一下 回复此楼
7楼2013-10-30 13:29:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sweet561 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +3 lemonzzn 2026-03-16 5/250 2026-03-16 20:43 by lemonzzn
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +3 大火山小火山 2026-03-16 5/250 2026-03-16 16:54 by barlinike
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 0856材料与化工309分求调剂 +6 ZyZy…… 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:38 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
[考研] 一志愿：武汉理工，材料工程，英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭