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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 表达小分子蛋白有什么技巧
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sweet561

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wanghx_2012 at 2013-10-30 15:15:59
蛋白分子量太小，低于14KD的蛋白在普通SDS-PAGE上就很难看跑好了，可以使用Tricine-SDS-PAGE,或则连接报道基因（GFP），再进行检测就方便了。

用Tricine-SDS-PAGE时，样品处理有什么特别的吗，是直接煮沸5min跟普通SDS-PAGE的样品处理一样吗？谢谢！
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11楼2013-11-05 12:45:20
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wanghx_2012

银虫 (小有名气)
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11楼: Originally posted by sweet561 at 2013-11-05 12:45:20
用Tricine-SDS-PAGE时，样品处理有什么特别的吗，是直接煮沸5min跟普通SDS-PAGE的样品处理一样吗？谢谢！...

有效分离1kDa小肽的Tricine-SDS-PAGE方法
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12楼2013-11-06 10:28:56
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
蛋白分子量太小，低于14KD应该使用Tricine-SDS-PAGE。

另外表达低分子量蛋白质时有时表达效果不好，可以把多个要表达的低分子量的小蛋白质融合在一起，彼此之间有酶切位点，并且C末端接上(His)6，这样表达时可以用镍柱纯化出融合蛋白质，同时检测融合蛋白质的表达效果，而后用酶切获得小分子蛋白质。
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13楼2013-11-06 12:30:47
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听香水榭2010

金虫 (初入文坛)
★
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我最近也在纯化一个小蛋白，普通的胶的确看不出来，后来试了三层胶，有上中下三层，分离效果很好，可惜蛋白没有表达！
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14楼2014-06-13 08:35:50
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露的想念

新虫 (小有名气)
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引用回帖:
11楼: Originally posted by sweet561 at 2013-11-05 12:45:20
用Tricine-SDS-PAGE时，样品处理有什么特别的吗，是直接煮沸5min跟普通SDS-PAGE的样品处理一样吗？谢谢！...

对啊，样品该怎么处理啊？
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15楼2014-10-09 14:47:29
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流水不争

铁杆木虫 (正式写手)

小木虫
★
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5楼: Originally posted by shyh1983 at 2013-10-30 10:58:35
你给个邮箱账号，我发给你。...

您好！能给我这个Tricine-SDS-PAGE 检测方法吗
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16楼2015-05-15 10:52:24
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dellxiong

金虫 (初入文坛)
★
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你试试tricine-page电泳

我也要走这方面工作，望交流！
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17楼2017-05-12 11:20:01
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