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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求教小分子与蛋白结合常数的测定方法
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piaoluodeyu

金虫 (小有名气)

[求助] 求教小分子与蛋白结合常数的测定方法

求教小分子与蛋白结合常数的测定方法，除了ITC和SPR外还有什么可供使用的啊！另外SPR测定小分子和蛋白靠谱吗？有人说靠谱，有人说不行！到底行不行啊！迷茫的小朋友求高手帮助啊！
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1楼 2011-12-05 17:14:03
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jingyu501

禁虫 (正式写手)
piaoluodeyu(金币+1): 这仪器估计全中国也没几台啊！ 2011-12-05 20:21:19
本帖内容被屏蔽
2楼2011-12-05 18:52:23
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)
能用软件模拟下嘛
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3楼2011-12-05 19:09:13
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piaoluodeyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by linyingjia at 2011-12-05 19:09:13:
能用软件模拟下嘛

模拟不靠谱啊！ 我就是用软件筛出来的 得找出实验事实来证明啊！
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4楼2011-12-05 20:09:38
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liuyufei3087

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

piaoluodeyu(金币+3): 2011-12-06 17:10:16
质谱和荧光，紫外
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5楼2011-12-06 09:34:13
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piaoluodeyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liuyufei3087 at 2011-12-06 09:34:13:
质谱和荧光，紫外

能说的详细点吗 偶是菜鸟不懂啊！！！
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6楼2011-12-06 17:10:46
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liuyufei3087

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
piaoluodeyu(金币+3): 这些方法是否能够达到准确定量的目的吗？ 2011-12-07 10:09:05
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-12-08 10:16:11
引用回帖:
6楼: Originally posted by piaoluodeyu at 2011-12-06 17:10:46:
能说的详细点吗 偶是菜鸟不懂啊！！！

质谱可以通过峰的强度来测，荧光和紫外都是由于加入小分子后蛋白质的峰变化，比如荧光会猝灭等等，你可以在维谱上在关键字就打个：牛血清白蛋白就有很多这种文章的
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7楼2011-12-06 17:21:06
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shun0021

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

piaoluodeyu(金币+3): 不知spr做蛋白和小分子是否有足够高的可靠度? 因为蛋白要固定在板上，不知信号是否足够达到定量检测的目的！ 2011-12-07 10:07:02
SPR的结果应该还可以吧，BIAcore和Fortebio都可以，要比荧光更灵敏
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8楼2011-12-06 21:28:23
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BioChemCom

银虫 (小有名气)
如果你的蛋白好表达的话，ITC比较好。如果说你的蛋白在E coli里面不好表达，可以在动物细胞里面过表达，利用Tag，纯化（当然量比较少），然后利用SPR技术，也是可以做到。
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9楼2011-12-07 19:11:59
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)
有蛋白质相互作用仪  看看能不能用
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10楼2011-12-07 20:02:30
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