24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2572  |  回复: 16

sweet561

银虫 (小有名气)

[交流] 表达小分子蛋白有什么技巧 已有11人参与

目前,正在用真核表达载体pPIC9K表达胰岛素基因,由于目的基因较小,蛋白分子量只有6.3KD,用SDS-PAGE电泳跑胶都比较弥散,看不出目的蛋白是否表达,希望各位能给予帮助,有什么好的方法,谢谢!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wanghx_2012

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-30 22:51:40
蛋白分子量太小,低于14KD的蛋白在普通SDS-PAGE上就很难看跑好了,可以使用Tricine-SDS-PAGE,或则连接报道基因(GFP),再进行检测就方便了。
9楼2013-10-30 15:15:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shyh1983

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-30 00:04:53
对于10kd以下的蛋白的电泳检测,要想得到好的结果,最好使用Tricine-SDS-PAGE进行检测。
3楼2013-10-29 16:35:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyt7638

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-30 22:51:47
Tricine-SDS-PAGE或20%的普通SDS-PAGE,电压要低30V   80V。
8楼2013-10-30 14:19:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinl03

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
融合到可溶性蛋白比如gst,mbp蛋白标签表达,中间加个intein,表达后诱导从intein切掉标签蛋白,就可以得到你的小蛋白

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2013-11-01 12:41:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

wuyao0513

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-30 00:04:58
可以调整胶的配制啊,选择更小的maker
2楼2013-10-29 11:46:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sweet561

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shyh1983 at 2013-10-29 16:35:47
对于10kd以下的蛋白的电泳检测,要想得到好的结果,最好使用Tricine-SDS-PAGE进行检测。

我也看到有文章用Tricine-SDS-PAGE进行检测,请问你用过此方法吗,能把具体的缓冲液及制胶方法说一下吗,谢谢!
4楼2013-10-30 08:48:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shyh1983

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by sweet561 at 2013-10-30 08:48:16
我也看到有文章用Tricine-SDS-PAGE进行检测,请问你用过此方法吗,能把具体的缓冲液及制胶方法说一下吗,谢谢!...

你给个邮箱账号,我发给你。
5楼2013-10-30 10:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sweet561

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by shyh1983 at 2013-10-30 10:58:35
你给个邮箱账号,我发给你。...

邮箱:sweet561@163.com,非常感谢!
6楼2013-10-30 11:37:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangpeng227

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看你干什么用了,要是带上个大一点的标签,比如GFP啥的,分子量大一点就好操作了。
7楼2013-10-30 13:29:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sweet561 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 266调剂 +7 daya sun 2026-04-07 8/400 2026-04-08 16:31 by 向9755
[考研] 一志愿哈工大,初试329,求环境科学与工程调剂! +11 余未辛 2026-04-06 11/550 2026-04-08 15:21 by screening
[考研] 生物学328分求调剂 +7 闪电kkl 2026-04-08 7/350 2026-04-08 13:54 by 蔡苏阳
[考研] 材料专硕322分 +12 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-02 12/600 2026-04-08 11:43 by 1753564080
[考研] 304求调剂 +10 素年祭语 2026-04-06 17/850 2026-04-08 09:05 by 蓝云思雨
[考研] 385分 生物学(071000)求调剂 +12 qf626 2026-04-01 12/600 2026-04-06 17:36 by 52305043001
[考研] 材料专硕322分 +10 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 21:22 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +6 cs0106 2026-04-05 6/300 2026-04-05 16:34 by imissbao
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-02 3/150 2026-04-05 13:02 by arrow8852
[考研] 一志愿西北农林畜牧专硕336分求调剂 +3 5ourr 2026-04-03 3/150 2026-04-05 10:40 by JOKER0401
[考研] 353求调剂 +10 MayUxw1 2026-04-03 10/500 2026-04-05 09:23 by 无际的草原
[考研] 325求调剂 +4 春风不借意 2026-04-04 4/200 2026-04-04 14:46 by 湘农储能材料
[考研] 317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂 +6 YinTai 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:30 by 无际的草原
[考研] 学硕288调剂!!! +3 小王xw123 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:20 by 啵啵啵0119
[考研] 调剂 +5 asdasdassda 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:27 by 岸上的一条鱼
[考研] 兽医调剂 +3 wh119216 2026-04-02 3/150 2026-04-03 19:34 by zrongyan
[考研] 数一英一285求调剂 +7 AZMK 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:03 by ms629
[考研] 求调剂 +3 心想事成可 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:22 by wangjy2002
[考研] 一志愿安徽大学0817化学工程与技术,求调剂 +14 我不是只因 2026-04-02 15/750 2026-04-03 09:49 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿北京科技材料科学与工程288分,求调剂 +14 是辰啊 2026-04-02 14/700 2026-04-02 21:10 by dongzh2009
信息提示
请填处理意见