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sweet561

银虫 (小有名气)

[交流] 表达小分子蛋白有什么技巧 已有11人参与

目前,正在用真核表达载体pPIC9K表达胰岛素基因,由于目的基因较小,蛋白分子量只有6.3KD,用SDS-PAGE电泳跑胶都比较弥散,看不出目的蛋白是否表达,希望各位能给予帮助,有什么好的方法,谢谢!
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yinl03

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
融合到可溶性蛋白比如gst,mbp蛋白标签表达,中间加个intein,表达后诱导从intein切掉标签蛋白,就可以得到你的小蛋白

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2013-11-01 12:41:17
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wuyao0513

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-30 00:04:58
可以调整胶的配制啊,选择更小的maker
2楼2013-10-29 11:46:41
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shyh1983

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-30 00:04:53
对于10kd以下的蛋白的电泳检测,要想得到好的结果,最好使用Tricine-SDS-PAGE进行检测。
3楼2013-10-29 16:35:47
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sweet561

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shyh1983 at 2013-10-29 16:35:47
对于10kd以下的蛋白的电泳检测,要想得到好的结果,最好使用Tricine-SDS-PAGE进行检测。

我也看到有文章用Tricine-SDS-PAGE进行检测,请问你用过此方法吗,能把具体的缓冲液及制胶方法说一下吗,谢谢!
4楼2013-10-30 08:48:16
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