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PCR琼脂糖凝胶电泳图希望大家帮我分析一下
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dongjingjia
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PCR琼脂糖凝胶电泳图希望大家帮我分析一下
试剂 使用量
ddH2O 36.5µl
10× EasyTaq Buffer 5μL
dNTPs 4μL
特异引物P1 1μL
特异引物P2 1μL
拟南芥、水稻cDNA模板 2μL
EasyTaq DNA Polymerase 0.5μL
总体积 50μL
PCR扩增程序如下:95℃ 5min;(95℃ 30S;53℃ 40S;72℃ 2min)×30cycles;
72℃ 10min;4℃保温。
PCR结果图
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1楼
2013-10-27 11:25:39
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dongjingjia
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7楼
:
Originally posted by
867575969
at 2013-10-27 21:33:49
如果有其他引物,换的试下当然更好...
因为引物都是老师设计好的,我感觉前三个可以p出来,那么引物应该没什么问题吧
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼
2013-10-27 23:21:52
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主要是后面几个条带不是很清楚,请问一下大家怎么解决
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2楼
2013-10-27 11:28:38
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867575969
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dongjingjia: 金币+2,
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有帮助
2013-10-27 11:40:20
gyesang: 金币+1, 鼓励交流!
2013-10-27 17:44:23
你有7个样本吗?可以适当提高退火温度试试,减少非特异性条带。
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有些东西因为得不到而变得美好,有些东西因为拥有而变得弥足珍贵!
3楼
2013-10-27 11:36:36
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3楼
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867575969
at 2013-10-27 11:36:36
你有7个样本吗?可以适当提高退火温度试试,减少非特异性条带。
不是有6个样本,只是第离maker最近的条带没有跑出来,前三个泳道是一个gene,中间空了一个,后三个泳道又是另一个基因,用同一台PCR,P的,后三个不是太好,所以不知道是不是改改体系,或者其他的
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4楼
2013-10-27 11:43:18
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