24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 7602  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

duke188

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞提蛋白做western blot 已有1人参与

我要提取细胞蛋白做western blot,使用6孔板培养细胞,请问高手们:
1.每培养瓶的细胞可以接种几个孔,每孔一般需要细胞数多少,加样多少ml?
2.提蛋白最少需要蛋白的量是多少?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forensic110

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

500K就够做WB,裂解液可以用150-300ul,最好测下蛋白总浓度来调整上样量,一般30-40ul足以。
7楼2013-11-26 13:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-17 10:38:41
接种细胞数量是以阴性孔在药物作用时间后,可以长满为合适。为了保证蛋白量,提蛋白时可以浓点,通过BCA检测蛋白浓度,控制上样蛋白浓度就可以了。
2楼2013-10-17 10:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duke188

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by daibingling at 2013-10-17 10:06:20
接种细胞数量是以阴性孔在药物作用时间后,可以长满为合适。为了保证蛋白量,提蛋白时可以浓点,通过BCA检测蛋白浓度,控制上样蛋白浓度就可以了。

新手第一次做,给我个大概的量呗
3楼2013-10-17 10:30:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daibingling

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by duke188 at 2013-10-17 10:30:59
新手第一次做,给我个大概的量呗...

上样量蛋白20-40微克就可以
4楼2013-10-17 11:40:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +11 否极泰来2026 2026-04-15 13/650 2026-04-20 22:31 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[考研] 320求调剂 +6 深郊akm 2026-04-17 6/300 2026-04-20 18:57 by fs26jie
[论文投稿] 期刊推荐 +3 材料研究生 2026-04-15 5/250 2026-04-20 16:02 by 豆豆7758
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +4 yexuqing 2026-04-19 4/200 2026-04-20 14:47 by brantleo
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 5/250 2026-04-20 10:47 by YuY66
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考研] 通信工程求调剂!!! +7 zlb770521 2026-04-14 7/350 2026-04-19 20:56 by Equinoxhua
[考研] 297,工科调剂? +11 河南农业大学-能 2026-04-14 11/550 2026-04-19 20:07 by Equinoxhua
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-19 17:16 by 中豫男
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[考研] 294求调剂 +15 淡然654321 2026-04-15 15/750 2026-04-19 08:20 by cuisz
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
信息提示
请填处理意见