24小时热门版块排行榜    

查看: 8006  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

duke188

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞提蛋白做western blot 已有1人参与

我要提取细胞蛋白做western blot,使用6孔板培养细胞,请问高手们:
1.每培养瓶的细胞可以接种几个孔,每孔一般需要细胞数多少,加样多少ml?
2.提蛋白最少需要蛋白的量是多少?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forensic110

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

500K就够做WB,裂解液可以用150-300ul,最好测下蛋白总浓度来调整上样量,一般30-40ul足以。
7楼2013-11-26 13:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-17 10:38:41
接种细胞数量是以阴性孔在药物作用时间后,可以长满为合适。为了保证蛋白量,提蛋白时可以浓点,通过BCA检测蛋白浓度,控制上样蛋白浓度就可以了。
2楼2013-10-17 10:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duke188

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by daibingling at 2013-10-17 10:06:20
接种细胞数量是以阴性孔在药物作用时间后,可以长满为合适。为了保证蛋白量,提蛋白时可以浓点,通过BCA检测蛋白浓度,控制上样蛋白浓度就可以了。

新手第一次做,给我个大概的量呗
3楼2013-10-17 10:30:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daibingling

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by duke188 at 2013-10-17 10:30:59
新手第一次做,给我个大概的量呗...

上样量蛋白20-40微克就可以
4楼2013-10-17 11:40:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 15/750 2026-09-01 12:23 by icm639
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见