| 查看: 7579 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
细胞提蛋白做western blot 已有1人参与
|
|||
|
我要提取细胞蛋白做western blot，使用6孔板培养细胞，请问高手们： 1.每培养瓶的细胞可以接种几个孔，每孔一般需要细胞数多少，加样多少ml？ 2.提蛋白最少需要蛋白的量是多少？ |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有141人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有2人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- Western blot试验中细胞密度如何确定？
已经有3人回复
- 请教有关Westen Blot抗体有关的问题
已经有16人回复
- Western Blot中蛋白条带信号强弱与上样体积不成正比的可能原因？
已经有3人回复
- westernblot 目标蛋白无条带
已经有9人回复
- 小分子蛋白的western blotting注意事项
已经有12人回复
- RT-PCR、western blot检测所需细胞数及细胞培养板的选择
已经有7人回复
- 细胞提取蛋白，做western blotting，怎么知道是提取总蛋白还是膜蛋白呢？
已经有4人回复
- 关于western blot样品制备
已经有8人回复
- 14kd的蛋白，做westernblot，电转条件是怎样的
已经有11人回复
- 做western 如何提蛋白可同时获得膜蛋白和胞内蛋白
已经有11人回复
- 有没有人用Western blot在做17kDa蛋白质,求经验！！！
已经有22人回复
- 提取细胞蛋白
已经有14人回复
- 24孔板细胞可以提RNA和蛋白吗
已经有3人回复
- Western Blot实验的蛋白条带都连在一起
已经有37人回复
- 多少细胞可以提蛋白做westen blot？
已经有10人回复
- 【求助/交流】什么是核蛋白什么是总蛋白？做western的时候有什么区别？
已经有7人回复
- 【求助/交流】请问用RIPA裂解液裂解后的蛋白能做ELISA吗？
已经有6人回复
- 【求助/交流】核蛋白的提取，有谁知道具体方案？
已经有6人回复
- 【求助/交流】为什么条带很细啊？郁闷呢！
已经有9人回复
- 【求助/交流】细胞核内蛋白和细胞浆蛋白提取有什么区别？
已经有4人回复
- 【求助/交流】做western blot时，细胞的要求
已经有12人回复
- 【求助/交流】western blot用奶粉封闭的原理
已经有18人回复
- Western Blot 磷酸化蛋白测定问题
已经有9人回复
【答案】应助回帖
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-31 13:06:02
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-31 13:06:02
| 铺板密度取决于你所养细胞的生长情况，可以做个预实验，铺几个密度，看看从铺板到你做实验哪个密度比较适合，所谓适合，就是细胞长满但是不挤。一般6孔板的一个孔，肿瘤细胞铺2乘10的5次方个，长两天左右，达到10的6次方以上就可以提蛋白做实验了，6孔板一般加2毫升培养基。如按前面所说的密度，提蛋白时6孔板的一个孔把细胞收集后加裂解液60-90微升，电泳时上样20-30微升，蛋白量足够。一般生长速度的细胞，一个T25的瓶长满但不挤的情况下，铺一块6孔板，剩下的继续培养是足够的。新手没做过，最好还是计数，最好测蛋白浓度，认真记录实验条件，以后才有经验，才能粗略估算。祝实验顺利！ |
5楼2013-10-31 11:03:47
daibingling
铁虫 (正式写手)
- 应助: 120 (高中生)
- 金币: 927.7
- 散金: 200
- 红花: 5
- 帖子: 406
- 在线: 110.6小时
- 虫号: 2116850
- 注册: 2012-11-09
- 专业: 药物分析
2楼2013-10-17 10:06:20
3楼2013-10-17 10:30:59
daibingling
铁虫 (正式写手)
- 应助: 120 (高中生)
- 金币: 927.7
- 散金: 200
- 红花: 5
- 帖子: 406
- 在线: 110.6小时
- 虫号: 2116850
- 注册: 2012-11-09
- 专业: 药物分析
4楼2013-10-17 11:40:53
