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zishilanxuan金虫 (小有名气)
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[求助]
蛋白电泳能跑出带来，但是测不出酶活
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请教各位大神一个问题，我现在蛋白电泳能跑出我要的条带，但是酶活测不出来，大家有没有遇到这个问题的？谢谢指教…… |
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5楼2013-09-30 21:59:34
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【答案】应助回帖
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| 不知道你的蛋白是原核表达的还是从组织中分离纯化的？也不知道你的蛋白是人源还是其它物种的？不管怎么样都应该先用western blotting证明那个是你的蛋白，最好用蛋白的特异抗体，表达的蛋白也可以用蛋白上带有的标签抗体。确认是你的蛋白了才能往后做。只通过跑胶看大小不能说明问题。分离纯化过程蛋白容易变性失活，分离纯化的方法不合适蛋白测不出来活性很正常。原核表达的蛋白没有活性更正常。原核表达的真核来源蛋白不能进行正确的修饰、折叠和加工，没活性太常见了。 |
4楼2013-09-30 14:17:08
