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hqqwdm

新虫 (正式写手)

[求助] 梯度PCR电泳图求分析

初学PCR,做了一个梯度PCR需求退火温度,如下图~
每个样都有两个条带,下面的条带应该为引物二聚体,上面的为目标序列~
改选哪个呢?梯度范围为48-62℃~
感谢各位虫友
梯度PCR电泳图求分析
梯度PCR.jpg
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yilunanxia

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-31 18:26:51
hqqwdm: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-09-01 14:42:31
不知道你的PCR仪器用的是哪一家公司的,我从你的图里看3 4 效果能好点。我觉得可以把引物的浓度稍微降低点儿(题外话呵呵)
2楼2013-08-31 15:36:41
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yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hqqwdm: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-09-01 14:42:39
2,3,4号 ,把引物量下降一半,在做一次
3楼2013-08-31 22:12:13
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hqqwdm

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yilunanxia at 2013-08-31 15:36:41
不知道你的PCR仪器用的是哪一家公司的,我从你的图里看3 4 效果能好点。我觉得可以把引物的浓度稍微降低点儿(题外话呵呵)

bio-rad T100
好的~我试试看把引物浓度降低一点~
谢谢你的回复
4楼2013-09-01 14:42:01
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hqqwdm

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yb19841014 at 2013-08-31 22:12:13
2,3,4号 ,把引物量下降一半,在做一次

嗯~我再试试看~
谢谢你的回复
5楼2013-09-01 14:42:23
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2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

建议选3
自主创业者,捣腾生物试剂
6楼2013-09-02 14:27:50
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grape_vine

金虫 (小有名气)

PCR要是用来做基因克隆的话,其实哪个温度都关系不大,只要不是最后一个扩不出来的就好。如果做检测的话,估计3,4,5温度可用,但是二聚体太多了。可能的话,换个没二聚体的吧
7楼2013-09-03 08:13:20
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hqqwdm

新虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by grape_vine at 2013-09-03 08:13:20
PCR要是用来做基因克隆的话,其实哪个温度都关系不大,只要不是最后一个扩不出来的就好。如果做检测的话,估计3,4,5温度可用,但是二聚体太多了。可能的话,换个没二聚体的吧

非常感谢~
我尝试减少了引物的量,但是同时PCR产物的量也降低了~所以我就想暂时不管引物二聚体,直接往下做了~
8楼2013-09-03 13:53:45
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hqqwdm

新虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 2008101111 at 2013-09-02 14:27:50
建议选3

谢谢~~
9楼2013-09-03 13:53:55
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