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梯度PCR电泳图求分析
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hqqwdm
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梯度PCR电泳图求分析
初学PCR,做了一个梯度PCR需求退火温度,如下图~
每个样都有两个条带,下面的条带应该为引物二聚体,上面的为目标序列~
改选哪个呢?梯度范围为48-62℃~
感谢各位虫友
梯度PCR.jpg
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2013-08-31 14:38:19
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yilunanxia
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2013-08-31 18:26:51
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2013-09-01 14:42:31
不知道你的PCR仪器用的是哪一家公司的,我从你的图里看3 4 效果能好点。我觉得可以把引物的浓度稍微降低点儿(题外话呵呵)
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2013-08-31 15:36:41
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hqqwdm: 金币+3,
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很有帮助
2013-09-01 14:42:39
2,3,4号 ,把引物量下降一半,在做一次
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3楼
2013-08-31 22:12:13
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hqqwdm
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2楼
:
Originally posted by
yilunanxia
at 2013-08-31 15:36:41
不知道你的PCR仪器用的是哪一家公司的,我从你的图里看3 4 效果能好点。我觉得可以把引物的浓度稍微降低点儿(题外话呵呵)
bio-rad T100
好的~我试试看把引物浓度降低一点~
谢谢你的回复
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:
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yb19841014
at 2013-08-31 22:12:13
2,3,4号 ,把引物量下降一半,在做一次
嗯~我再试试看~
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5楼
2013-09-01 14:42:23
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PCR要是用来做基因克隆的话,其实哪个温度都关系不大,只要不是最后一个扩不出来的就好。如果做检测的话,估计3,4,5温度可用,但是二聚体太多了。可能的话,换个没二聚体的吧
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7楼
2013-09-03 08:13:20
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7楼
:
Originally posted by
grape_vine
at 2013-09-03 08:13:20
PCR要是用来做基因克隆的话,其实哪个温度都关系不大,只要不是最后一个扩不出来的就好。如果做检测的话,估计3,4,5温度可用,但是二聚体太多了。可能的话,换个没二聚体的吧
非常感谢~
我尝试减少了引物的量,但是同时PCR产物的量也降低了~所以我就想暂时不管引物二聚体,直接往下做了~
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8楼
2013-09-03 13:53:45
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6楼
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2008101111
at 2013-09-02 14:27:50
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谢谢~~
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9楼
2013-09-03 13:53:55
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