24小时热门版块排行榜    

查看: 4699  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

键盘上的脚丫

金虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖电泳rna ,跑成这样,是怎么回事?求指导

Sample Text

我做的是马氏珠母贝的外套膜和边缘膜的RNA的提取

操作步骤是这样的:
1、样品早上10点从贝中提取出来,接着在液氮中冻存并保存了4个小时
2、下午2点做,用于depc处理过的2微升管取样并加入tirzol  1ml,加入小钢珠,用匀浆器匀浆8分钟
3、用镊子取出小钢珠,放置5min
4、加入氯仿200微升,涡旋30s
4、12000r,4℃,15min
5、吸取上清400微升于depc处理过的1.5ml离心管中,异丙醇400微升
6、室温放置10min
7、12000r,4℃,10min
8、弃去上清,加入1ml 的75%depc配置的乙醇,剧烈震荡
9、12000r,4℃,5min
10、在垂直层流操作台晾干10min,加入20微升的depc水溶解(没有pcr ,也没有测过其浓度,师姐说不用,测没意义)。
11、琼脂糖凝胶电泳 ,其余样品-80℃保存。
12、琼脂糖凝胶的配置:
        凝胶浓度:1%   
       电压:120V
       电流:60MA
       跑的时间:30min
缓冲液:0.5xTBE
琼脂糖电泳rna ,跑成这样,是怎么回事?求指导
RNA电泳图.PNG

[ Last edited by 键盘上的脚丫 on 2013-8-19 at 20:53 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

石头雪儿

金虫 (正式写手)

匀浆的话,最好还是用液氮吧,这样处理温度低,耗时短,有利于防止RNA酶的作用,从你跑的胶上来看,好像是降解了吧,一般情况下是能看到三条带的
14楼2013-08-25 15:06:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 键盘上的脚丫 的主题更新
信息提示
请填处理意见