[交流] PCR条带不亮求助已有8人参与

本人分子菜鸟一枚，PCR跑1%的琼脂糖电泳，第四泳道的条带不是很亮，求大神指点下！谢谢。。。
PCR过程：
95℃ 5min
94℃ 30s
55℃ 30s
72℃ 2.5min
72℃ 7min
30个循环

IMG_2510.JPG

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wangqi1107

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好好搞学术

1楼 2013-07-25 09:38:18

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史前五百年

金虫 (正式写手)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 3963.8
散金: 16
红花: 3
帖子: 965
在线: 137小时
虫号: 1096769
注册: 2010-09-12
性别: GG
专业: 蛋白质组学

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 正解！ 2013-07-26 12:44:57

多问问你的师姐师兄这样他们有经验而且直接有效。

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9楼2013-07-26 10:00:49

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biomed_fanyi

新虫 (初入文坛)

应助: 11 (小学生)
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红花: 1
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在线: 27.6小时
虫号: 2520349
注册: 2013-06-25

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩。 2013-07-25 14:28:09

你是说 PCR 产物量不够？你load了多少样品？

你的PCR产物是为了做什么？如果是分子克隆，产物足够的话（比如说胶上load了5ul 但是你总共有20ul)，应该问题不大。需要注意的反而是上面的那个非特异带。你可能要纯化一下你需要的条带

如果真是做克隆，担心量少的话，你就多做几个pcr，合在一起好了。

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2楼2013-07-25 11:17:02

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