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liu_chen_na

新虫 (初入文坛)

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[求助] 富含AT启动子序列克隆？

以cDNA序列第一外显子为模板设计引物克隆上游启动子序列（植物），采用HI TAIL PCR方法已经克隆出两段各400bp，除去重叠序列，大概已经得到700bp序列，但后面再也走不动了，尝试过换site finding pcr方法也没克出带。通过目前已得到的序列分析，这段启动子序列，AT含量大概70%左右，GC含量低，难设计高退火引物。请教各位老师学长高手专家们，接下来我该怎么办？

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1楼 2013-07-22 09:57:16

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王菇凉

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

同求！不知道你现在做的怎么样了，我只克出来300bp，也是往下走不下去了，希望给点帮助！！

2楼2013-08-06 11:02:34

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