应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量过程中污染的问题 切切！！
51/1返回列表
查看: 1405  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

学术问题

银虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量过程中污染的问题 切切！！

首先：提取RNA 后，是先进行RNA的混合好还是反转录后cDNA的混合好。
其次：荧光定量过程中（已经成cDNA）,所用的枪头、八连管、去离子水需要用DEPC处理吗，或者哪些需要处理？还有对粉状引物稀释用的去离子水是不是只需要灭菌就行了，不需要DEPC处理?

本人新手 还望海涵！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
微生物小硕
1楼 2013-07-19 10:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li201018

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
学术问题(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-19 11:57:39
检测的是mRNA表达量，所以是先混RNA（这时的RNA浓度一定要一致）后反转录。
赞一下 回复此楼
低调！务实！
4楼2013-07-19 11:08:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
学术问题(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-19 11:57:19
学术问题: 金币+2, ★有帮助 2013-07-19 20:55:37
depc就是RNase抑制剂，是用来防止RNA降解的，已经是cdna了，就没必要了
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-19 10:52:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
学术问题(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-19 11:57:28
第一句话没看明白，是混合什么啊？
荧光定量PCR的时候所用耗材要求没有那么严格的，耗材高压灭菌就可以，豪放一点的高压灭菌也可以省去。水我正常是用超纯水，去离子水水问题应该也不大，需要注意的是避免交叉污染，阴性对照可以检测。
引物溶解灭菌后的去离子水是可以用的。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-07-19 11:00:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学术问题

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wangweida2 at 2013-07-19 11:00:17
第一句话没看明白，是混合什么啊？
荧光定量PCR的时候所用耗材要求没有那么严格的，耗材高压灭菌就可以，豪放一点的高压灭菌也可以省去。水我正常是用超纯水，去离子水水问题应该也不大，需要注意的是避免交叉污染 ...

我是第0,1,2,3,4,5,6，7，……40天 分别对实验组和对照组取样。后提取RNA。是先把实验组和对照组的RNA分别等量混合后反转录cDNA ,还是先把实验组和对照组的RNA反转录成cDNA后、在进行等量混合？？我觉得都是一样的啊，我觉得是先反转录好，如果是先对RNA混合的话，RNA容易降解。是不是啊？
赞一下 回复此楼
微生物小硕
5楼2013-07-19 21:02:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:26 by ECLTXnJnRSXf
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:33 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:31 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:20 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 5/250 2026-11-12 11:14 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:09 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:03 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:41 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:38 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:30 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 FChKX8meu1ds 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:43 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 4/200 2026-11-12 06:14 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 05:41 by 9fOTqj074tIg
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:30 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 02:23 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭