应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量过程中污染的问题 切切！！
51/1返回列表
查看: 1280  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

学术问题

银虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量过程中污染的问题 切切！！

首先：提取RNA 后，是先进行RNA的混合好还是反转录后cDNA的混合好。
其次：荧光定量过程中（已经成cDNA）,所用的枪头、八连管、去离子水需要用DEPC处理吗，或者哪些需要处理？还有对粉状引物稀释用的去离子水是不是只需要灭菌就行了，不需要DEPC处理?

本人新手 还望海涵！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
微生物小硕
1楼 2013-07-19 10:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学术问题

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wangweida2 at 2013-07-19 11:00:17
第一句话没看明白，是混合什么啊？
荧光定量PCR的时候所用耗材要求没有那么严格的，耗材高压灭菌就可以，豪放一点的高压灭菌也可以省去。水我正常是用超纯水，去离子水水问题应该也不大，需要注意的是避免交叉污染 ...

我是第0,1,2,3,4,5,6，7，……40天 分别对实验组和对照组取样。后提取RNA。是先把实验组和对照组的RNA分别等量混合后反转录cDNA ,还是先把实验组和对照组的RNA反转录成cDNA后、在进行等量混合？？我觉得都是一样的啊，我觉得是先反转录好，如果是先对RNA混合的话，RNA容易降解。是不是啊？
赞一下 回复此楼
微生物小硕
5楼2013-07-19 21:02:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
学术问题(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-19 11:57:19
学术问题: 金币+2, ★有帮助 2013-07-19 20:55:37
depc就是RNase抑制剂，是用来防止RNA降解的，已经是cdna了，就没必要了
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-19 10:52:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
学术问题(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-19 11:57:28
第一句话没看明白，是混合什么啊？
荧光定量PCR的时候所用耗材要求没有那么严格的，耗材高压灭菌就可以，豪放一点的高压灭菌也可以省去。水我正常是用超纯水，去离子水水问题应该也不大，需要注意的是避免交叉污染，阴性对照可以检测。
引物溶解灭菌后的去离子水是可以用的。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-07-19 11:00:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li201018

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
学术问题(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-19 11:57:39
检测的是mRNA表达量，所以是先混RNA（这时的RNA浓度一定要一致）后反转录。
赞一下 回复此楼
低调！务实！
4楼2013-07-19 11:08:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 青基如何破局 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +15 爱看书的可乐 2026-08-26 17/850 2026-08-27 17:25 by xxniao123
[基金申请] 基金不中，共勉 +10 eulota 2026-08-26 10/500 2026-08-27 17:23 by lqllinqiaoli
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 面上合作单位盖章 +3 ssyjh 2026-08-27 3/150 2026-08-27 09:59 by 阿拉贡aragon
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 17/850 2026-08-27 08:20 by 大萍1987
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭