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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

[交流] 酵母转化验证方法 已有5人参与

一般质粒转入酵母后,要怎样验证是否成功转入呢?质粒上插入的片段在基因组上也有,而且转入后也以质粒形式存在的。
都要提取质粒的话,工作量确实挺大的。而且我提取质粒后做PCR,虽然有条带,但是条带大小不对啊。。。,有的去测序,结果和基因组上的某个基因是一样的(质粒上的启动子是该基因的),郁闷啊。。。不知道是什么原因
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20083630zhan

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的目的基因在质粒和基因组上都有,有可能在你转化的时候,质粒上的基因与基因组上的基因重组了
6楼2013-07-17 09:32:46
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20083630zhan

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by piaoyunokok at 2013-07-17 10:04:03
理论上讲,是有这个可能。但是PCR的条带大小及测序结果都说明不是啊,就是基因组上的另一个基因。。。...

你可以分别将基因组和质粒提出来,分别PCR,看看跑胶的条带
8楼2013-07-17 11:05:43
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