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酵母转化后筛选
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| 大家好,最近刚刚做酵母遇到了一点问题,想请教下大家,我是做的毕赤酵母的转化,首先我将我的质粒(pPIC9K)线性化之后电转进入酵母中,同时涂了MD板和YPD板(0.25mg/ml G418),MD板上生长了很多的单菌落,YPD板上没有生长,随后又将在MD板上生长的菌落挑取到YPD(1mg/ml G418)板上 发现生长的菌落很少,而同期做的其他的转化却生长了很多菌落,正在纠结中...还望大侠给解释下下一步怎么做?接种在YPD板上的菌落和接种量有关吗?用牙签挑单菌落时应该注意些什么等等?并请给分析下原因 谢谢了... |
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