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cpugaga

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母转化后筛选

大家好,最近刚刚做酵母遇到了一点问题,想请教下大家,我是做的毕赤酵母的转化,首先我将我的质粒(pPIC9K)线性化之后电转进入酵母中,同时涂了MD板和YPD板(0.25mg/ml G418),MD板上生长了很多的单菌落,YPD板上没有生长,随后又将在MD板上生长的菌落挑取到YPD(1mg/ml G418)板上 发现生长的菌落很少,而同期做的其他的转化却生长了很多菌落,正在纠结中...还望大侠给解释下下一步怎么做?接种在YPD板上的菌落和接种量有关吗?用牙签挑单菌落时应该注意些什么等等?并请给分析下原因 谢谢了...

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cpugaga

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 路基亚的暴诞 at 2012-03-08 11:49:52:
我也再做,酵母长不出来,杂菌到不少,我用的G-418浓度时300ug/ml,也在这纠结啊

好吧 你还是比较可怜的一族 哈哈 祝好运
3楼2012-03-08 16:07:20
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路基亚的暴诞

金虫 (正式写手)

我也再做,酵母长不出来,杂菌到不少,我用的G-418浓度时300ug/ml,也在这纠结啊
2楼2012-03-08 11:49:52
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路基亚的暴诞

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cpugaga at 2012-03-08 16:07:20:
好吧 你还是比较可怜的一族 哈哈 祝好运

重头再来
4楼2012-03-09 09:54:54
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