24小时热门版块排行榜    

查看: 1011  |  回复: 3
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看

windleakey

金虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母转化的问题

我最近做的一次酵母的电击转化,毕赤酵母GS115,1.5kv电击涂MD板子,3天多左右长出白色的小菌落,特别多特别密,形态很像早期的酵母菌落,但没平时转化的酵母大,我很怀疑是不是我要的菌,等了一天多,发现菌落不长大,但数量更多了,请问大家这到底是个啥啊?有没有有经验的大神。。。谢谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab: 金币+5, MicEPI+1, 鼓励新虫,谢谢交流哦~~~ 2012-07-16 12:22:32
引用回帖:
3楼: Originally posted by windleakey at 2012-07-16 12:12:25
谢谢了 我也觉得是杂菌 只是他们长得太均一了稍微有侥幸心理 能给我看看你的转化这部分的步骤吗 我这是做的第三次 前两次转化效率也都不高 只有十来个菌落 谢谢了...

转化比较简单,线性化DNA加入感受态(一般2ug加入80uL感受态),冰浴5min,电击,加1mL冰预冷1 M山梨醇,取400uL涂MD板;如果是抗性板要复苏1h再涂板。
我在资源帖上传了一篇文献,关于提高毕赤酵母转化效率的,你可以看看。我大多使用这种现做现用的感受态。
4楼2012-07-16 12:17:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人认为,应该是染菌了,当然也有例外,有时候酵母会长很慢。我转化毕赤酵母一般1天半的时候能看出明显的菌落,2天就基本长好了。所以从常规来讲3天才出现就是染菌了。不过如果你做的是敲除酵母的基因,那就有可能会减慢很多。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-07-16 10:52:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windleakey

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by reallpf at 2012-07-16 10:52:09
个人认为,应该是染菌了,当然也有例外,有时候酵母会长很慢。我转化毕赤酵母一般1天半的时候能看出明显的菌落,2天就基本长好了。所以从常规来讲3天才出现就是染菌了。不过如果你做的是敲除酵母的基因,那就有可能 ...

谢谢了 我也觉得是杂菌 只是他们长得太均一了稍微有侥幸心理 能给我看看你的转化这部分的步骤吗 我这是做的第三次 前两次转化效率也都不高 只有十来个菌落 谢谢了
3楼2012-07-16 12:12:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 windleakey 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见