24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 859  |  回复: 3
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看

windleakey

金虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母转化的问题

我最近做的一次酵母的电击转化,毕赤酵母GS115,1.5kv电击涂MD板子,3天多左右长出白色的小菌落,特别多特别密,形态很像早期的酵母菌落,但没平时转化的酵母大,我很怀疑是不是我要的菌,等了一天多,发现菌落不长大,但数量更多了,请问大家这到底是个啥啊?有没有有经验的大神。。。谢谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab: 金币+5, MicEPI+1, 鼓励新虫,谢谢交流哦~~~ 2012-07-16 12:22:32
引用回帖:
3楼: Originally posted by windleakey at 2012-07-16 12:12:25
谢谢了 我也觉得是杂菌 只是他们长得太均一了稍微有侥幸心理 能给我看看你的转化这部分的步骤吗 我这是做的第三次 前两次转化效率也都不高 只有十来个菌落 谢谢了...

转化比较简单,线性化DNA加入感受态(一般2ug加入80uL感受态),冰浴5min,电击,加1mL冰预冷1 M山梨醇,取400uL涂MD板;如果是抗性板要复苏1h再涂板。
我在资源帖上传了一篇文献,关于提高毕赤酵母转化效率的,你可以看看。我大多使用这种现做现用的感受态。
4楼2012-07-16 12:17:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人认为,应该是染菌了,当然也有例外,有时候酵母会长很慢。我转化毕赤酵母一般1天半的时候能看出明显的菌落,2天就基本长好了。所以从常规来讲3天才出现就是染菌了。不过如果你做的是敲除酵母的基因,那就有可能会减慢很多。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-07-16 10:52:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windleakey

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by reallpf at 2012-07-16 10:52:09
个人认为,应该是染菌了,当然也有例外,有时候酵母会长很慢。我转化毕赤酵母一般1天半的时候能看出明显的菌落,2天就基本长好了。所以从常规来讲3天才出现就是染菌了。不过如果你做的是敲除酵母的基因,那就有可能 ...

谢谢了 我也觉得是杂菌 只是他们长得太均一了稍微有侥幸心理 能给我看看你的转化这部分的步骤吗 我这是做的第三次 前两次转化效率也都不高 只有十来个菌落 谢谢了
3楼2012-07-16 12:12:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 windleakey 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +13 Faune 2026-04-06 13/650 2026-04-06 22:35 by chenzhimin
[考研] 327考研调剂推荐 +6 呜呜呜呜呢 2026-04-06 6/300 2026-04-06 21:39 by 啵啵啵0119
[考研] 机械专硕274求调剂,不挑专业学校 +6 泛泛2333 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:06 by 泛泛2333
[考研] 307求调剂 +3 所念及所望 2026-04-06 3/150 2026-04-06 17:30 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿国科大信工所,英二数二408总分293分求调剂 +3 ilcyuan 2026-04-02 4/200 2026-04-06 16:35 by likeihood
[考研] 266求调剂 +19 阳阳哇塞 2026-04-01 19/950 2026-04-06 15:47 by lin-da
[考研] 372分,材料与化工,一志愿湖南大学,求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-01 3/150 2026-04-06 09:04 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +11 熊二想上岸 2026-04-04 11/550 2026-04-05 22:21 by 醉翁wl
[考研] 求调剂求调剂 +8 121. 2026-04-02 8/400 2026-04-05 20:15 by lys0704
[考研] 计算机11408,286分求调剂 +7 木子念晞 2026-04-05 7/350 2026-04-05 19:02 by chy09050039
[考研] 295求调剂 +8 FZAC123 2026-04-03 8/400 2026-04-05 17:46 by 蓝云思雨
[考研] 344材料与化工调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:10 by happyddm
[考研] 333求调剂 +9 阿科逸 2026-03-31 9/450 2026-04-04 18:25 by macy2011
[考研] 278求调剂 +6 Yy7400 2026-04-03 6/300 2026-04-04 09:53 by zhangdingwa
[考研] 320求调剂 +5 振—TZ 2026-04-02 5/250 2026-04-03 14:42 by fxue1114
[考研] 316求调剂 +14 舟自梗 2026-04-01 18/900 2026-04-03 10:28 by linyelide
[考研] 材料340分调剂 +7 夏夜晚风_long 2026-04-02 9/450 2026-04-02 21:20 by dongzh2009
[考研] 318求调剂,计算材料方向 +10 吸喵有害笙命 2026-04-01 11/550 2026-04-02 16:29 by oooqiao
[考研] 农学考研求调剂 +3 dkdkxm 2026-04-01 3/150 2026-04-02 16:04 by wangjagri
[考研] 一志愿北交大材料工程,总分358 +4 cs0106 2026-04-01 4/200 2026-04-02 07:42 by 尚水阁主
信息提示
请填处理意见