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chpeel

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母菌被摇成豆腐渣了,急急急!!!

毕赤酵母菌X33,GS115,KM71H划固体YPD平板,两天后挑单克隆(感觉比较正常),YPD液体培养基中30度过夜培养后就会出现豆腐渣状的物质,感觉像是细胞破裂成碎片了。
    可以确定培养时温度为30度,没有染杂菌,氧气充足(纱布封口,100mL的YPD/500mL的三角瓶),250rpm/min。培养基用的是yeast,peptone和葡萄糖,我试了很多次都是这样的。
   像渣子一样的沉淀,细胞聚合抱团?不知道是什么东西(附图)。我是准备做电转化的,酵母这个状态不敢往下做。一年之前做的时候,有一个摇瓶也是这个样,其它摇瓶正常,不知道什么原因。急~~急~~急~~啊,拖了快一个月了,请高手帮忙看看,谢谢了~
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thaw

铜虫 (小有名气)

★ ★
看天(金币+2): 鼓励分享经验 2011-08-10 13:22:32
我也遇到过,换全营养培养基正常
8楼2011-08-10 12:32:25
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xiaojun542

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

酵母絮凝了吧。酵母过早絮凝可能是某种物质(或一组物质)引起的。
20楼2012-09-25 16:25:59
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普通回帖

31569218

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~祝顺利! 2011-08-04 11:16:04
chpeel(金币+2): 试试看吧,谢谢了 2011-08-04 14:56:48
我上次是农杆菌这样子了,我的做法是:
离心,去上清,然后悬浮
爱之深痛之切
2楼2011-08-04 09:07:27
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

遇到过,但也不清楚是什么原因,就好像是聚集了一样!!
3楼2011-08-04 13:12:27
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chpeel

金虫 (小有名气)

咋没高手应贴呢,顶一下,别沉了~
4楼2011-08-07 00:00:09
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q1009501313

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢交流 2011-08-07 12:24:17
chpeel(金币+2): 试试看,谢谢了! 2011-08-23 13:41:24
遇到过、不清楚是什么原因、有人说葡萄糖有问题、你自己再试试
5楼2011-08-07 09:22:37
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展心

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
看天(金币+2): 鼓励 2011-08-10 13:22:11
chpeel(金币+2): 试试看,谢谢了! 2011-08-23 13:41:35
培养基是怎么配的?没见过这种情况,可以试着调整一下培养的时间
6楼2011-08-09 11:09:27
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evan1987

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
看天(金币+2): 鼓励分享经验 2011-08-10 13:22:21
chpeel(金币+2): 试试看,谢谢了! 2011-08-23 13:41:44
我们实验室培养时也出现这种情况,降低培养温度,减少接种量会好点。
7楼2011-08-09 13:42:58
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flamehaze

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+10): 处女帖 2011-08-10 17:02:24
chpeel(金币+2): 试试看,谢谢了! 2011-08-23 13:41:59
菌种活化时遇到过,蛋白表达才是王道
9楼2011-08-10 15:45:47
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利! 2011-08-22 16:54:13
chpeel(金币+2): 试试看,谢谢了! 2011-08-23 13:42:06
个人认为是摇过了,减少培养时间,做感受态要求的OD600=1.3-1.5之间。
10楼2011-08-11 10:42:33
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