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chpeel

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母菌被摇成豆腐渣了,急急急!!!

毕赤酵母菌X33,GS115,KM71H划固体YPD平板,两天后挑单克隆(感觉比较正常),YPD液体培养基中30度过夜培养后就会出现豆腐渣状的物质,感觉像是细胞破裂成碎片了。
    可以确定培养时温度为30度,没有染杂菌,氧气充足(纱布封口,100mL的YPD/500mL的三角瓶),250rpm/min。培养基用的是yeast,peptone和葡萄糖,我试了很多次都是这样的。
   像渣子一样的沉淀,细胞聚合抱团?不知道是什么东西(附图)。我是准备做电转化的,酵母这个状态不敢往下做。一年之前做的时候,有一个摇瓶也是这个样,其它摇瓶正常,不知道什么原因。急~~急~~急~~啊,拖了快一个月了,请高手帮忙看看,谢谢了~
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利! 2011-08-22 16:54:13
chpeel(金币+2): 试试看,谢谢了! 2011-08-23 13:42:06
个人认为是摇过了,减少培养时间,做感受态要求的OD600=1.3-1.5之间。
10楼2011-08-11 10:42:33
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31569218

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~祝顺利! 2011-08-04 11:16:04
chpeel(金币+2): 试试看吧,谢谢了 2011-08-04 14:56:48
我上次是农杆菌这样子了,我的做法是:
离心,去上清,然后悬浮
爱之深痛之切
2楼2011-08-04 09:07:27
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

遇到过,但也不清楚是什么原因,就好像是聚集了一样!!
3楼2011-08-04 13:12:27
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chpeel

金虫 (小有名气)

咋没高手应贴呢,顶一下,别沉了~
4楼2011-08-07 00:00:09
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