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dewdan

新虫 (初入文坛)

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专业: 生物化学

[求助] 原核表达引物设计问题

我做原核表达的，设计引物时上下游引物GC含量只有40、43℃，退火温度62左右，但是P不出条带来，是因为引物GC含量低了吗

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1楼2013-07-04 20:17:06

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lillian菲

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助！ 2013-07-05 15:06:29

你好，引物GC含量影响不是特别的大，在40-60%之间即可。主要是退火温度，一般设计的理论值比实际操作还要再低5度。也就是说，你设计的是62度，实际实验时只需设置57度即可

5楼2013-07-05 10:55:01

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