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Ayaolearn

木虫 (著名写手)

[求助] 请问His-tag(组氨酸标签)怎么加到酶蛋白上?

请问有什么方法可以把His-tag加到酶上面,不通过基因工程的方法,通过化学合成方法怎么做啊?前提是不能影响酶的活性!谢谢啊
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-11 22:29:47
用很多真核表达载体都是带有His的,比如pcDNA3.1,将目的基因克隆到载体里的时候不要将终止密码子带进去,载体上His标签后面紧跟着就是终止密码子,这样表达出来的蛋白在3末端就会带有6个His,不会影响蛋白活性。
6楼2013-07-09 17:05:47
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Ayaolearn

木虫 (著名写手)

一个星期了,还是没人甩我,汗!
自己顶一个!!
追求中...
2楼2013-07-09 13:36:10
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薛虹妮

银虫 (小有名气)

1949stone: 发挥你的智慧 想一个好办法 2013-07-09 15:11:33
额····化学合成····还要不失活····这不容易啊···
3楼2013-07-09 13:57:08
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

一般都是将His-tag通过基因工程,突变基因最后的终止密码子将标签连上的,通过化学方法将标签连接到酶上,没听过
5楼2013-07-09 15:17:57
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