应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR总是出现好多突变怎么办啊
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 2238  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dewdan

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR总是出现好多突变怎么办啊

PCR扩增cDNA连到t载体后测序结果总是有很多突变怎么办啊？？1800bp就有十几个突变，翻译成氨基酸也是有八九个突变，用的是phusion酶啦，郁闷……求各位高手指点
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-23 16:32:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xwchen24

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-23 20:00:36
楼主需要优化反应体系,,,根据phusion的说明书来，，或者有可能使SNP,,,
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-23 17:12:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongyanna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-23 20:00:44
高保真酶也有一定的错配，要不优化体系要不换换其他更高级的高保真酶！
赞一下 回复此楼
自己的路，自己快乐的走
3楼2013-06-23 18:47:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 同意 2013-06-24 07:57:18
换高保真酶，反应体系尽量标准，也能提高准确性。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-23 19:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dewdan: 金币+2, ★有帮助, 只能试试了……谢谢啦 2013-06-24 13:32:14
dewdan: 金币+3, ★有帮助 2013-07-05 10:27:07
提高退火温度，减少非特异扩增，换成高保真酶。
赞一下 回复此楼
5楼2013-06-23 20:21:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试试提高退火温度，减少循环数目。
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-23 23:23:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
Phusion 1800bp十几个突变基本不可能的。。

LZ你的测序结果图谱怎么样？用几个引物测得序？  不同克隆突变有一致性么？
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2013-06-24 03:46:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dewdan 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 321求调剂 +4 认真求上学 2026-04-03 4/200 2026-04-04 11:02 by rzh123456
[考研] 一志愿郑州大学材料与化工085600，求调剂 +19 吃的不少 2026-04-02 19/950 2026-04-04 10:26 by 来看流星雨10
[考研] 一志愿085404，总分291，四级已过，求调剂 +5 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 6/300 2026-04-04 10:08 by 一切OK
[考研] 350一志愿北京航空航天大学08500材料科学与工程求调剂 +5 kjnasfss 2026-04-03 5/250 2026-04-03 22:29 by 无际的草原
[考研] 329求调剂，一志愿西北工业大学，材料工程（085601） +8 小小机灵虫 2026-03-29 14/700 2026-04-03 19:38 by lijunpoly
[考研] 材料专硕 调剂 +11 CXN123456 2026-04-03 11/550 2026-04-03 14:09 by 1753564080
[考研] 285求调剂 +6 FZAC123 2026-03-30 6/300 2026-04-03 12:22 by xingguangj
[考研] 338求调剂，一志愿能源动力，外语是日语203 +5 zzz，，r 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:45 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿陕西师范大学生物学317分 +5 1563日。 2026-04-02 5/250 2026-04-03 06:58 by ilovexiaobin
[考研] 372分材料与化工（085600）一志愿湖南大学求调剂 +5 蓝笺片 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:37 by dongzh2009
[考研] 学硕化学工程与技术，一志愿中国海洋大学320+求调剂 +8 披星河 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:12 by oooqiao
[考研] 337求调剂 +11 《树》 2026-03-29 11/550 2026-04-02 10:20 by 不吃魚的貓
[考研] 生物学327，求调剂 +5 书上的梅子 2026-04-01 6/300 2026-04-02 06:47 by ilovexiaobin
[考研] 350求调剂 +7 阿佳～ 2026-03-31 7/350 2026-04-01 16:12 by yanflower7133
[考研] 一志愿北交材料工程总分358 +5 cs0106 2026-04-01 7/350 2026-04-01 11:45 by wangjy2002
[考研] 318求调剂 +10 陈晨79 2026-03-30 10/500 2026-03-31 17:37 by 544594351
[考研] 求收留 +8 1943443204 2026-03-28 8/400 2026-03-31 15:00 by -迷了路啊路
[考研] 一志愿中海洋材料357 +4 麦恩莉. 2026-03-30 4/200 2026-03-31 14:35 by 记事本2026
[考研] 生物考研337分求调剂 +4 cgxin 2026-03-30 6/300 2026-03-31 14:18 by 记事本2026
[考研] 0703 化学 求调剂，一志愿山东大学 342 分 +7 Shern—- 2026-03-28 7/350 2026-03-30 16:31 by nothing投稿中
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭