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119904386铁虫 (小有名气)
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[求助]
16s引物扩增大肠杆菌，产物不是1500，而是在700上下各有一条带
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用的是这对引物： 16s-F：5-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3 16s-R：5-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA-3 开始是因为拿这对引物扩增芽孢杆菌得不到目的条带，直接做的菌液PCR，未煮沸也没提取DNA。于是就怀疑芽孢菌是不是形成芽孢后95度预变性破坏不了菌体（预变性10min还是不行），无法释放出DNA模板。所以，想拿G-菌（大肠杆菌）做个对照。奇怪的是，大肠杆菌的扩增产物并不是1.5kb，而是在marker 700bp上下各有一条带（也许加起来1.5kb），同时芽孢菌还是没有带 求解 |
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志子
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